【摘 要】
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目的:通过观察转染PGRMC2过表达或干扰慢病毒载体后卵巢癌肿瘤细胞的体外生长、迁移能力,探讨PGRMC2表达水平是否对卵巢癌肿瘤细胞的体外生长、迁移产生影响。方法:1.将高表达PGRMC2的人卵巢癌细胞株HO-8910分为三组:分别为含有PGRMC2干扰慢病毒载体的HO-8910-Si RNA实验组,含有空病毒载体的HO-8910-NC阴性对照组及不含慢病毒的HO-8910-Ctrl空白对照组;
【基金项目】
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遵义市科学技术局（遵市科合设字（2018）70）；
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目的:通过观察转染PGRMC2过表达或干扰慢病毒载体后卵巢癌肿瘤细胞的体外生长、迁移能力,探讨PGRMC2表达水平是否对卵巢癌肿瘤细胞的体外生长、迁移产生影响。方法:1.将高表达PGRMC2的人卵巢癌细胞株HO-8910分为三组:分别为含有PGRMC2干扰慢病毒载体的HO-8910-Si RNA实验组,含有空病毒载体的HO-8910-NC阴性对照组及不含慢病毒的HO-8910-Ctrl空白对照组;将低表达PGRMC2的人卵巢癌细胞株SKOV3分为三组:分别为含有PGRMC2过表达慢病毒载体的SKOV3-OE实验组,含有空病毒载体的SKOV3-NC阴性对照组及不含慢病毒的SKOV3-Ctrl空白对照组。对各组细胞株进行慢病毒转染72h后将其置于荧光显微镜下进行观察,确定各组细胞表达荧光蛋白GFP的程度。2.利用实时荧光定量PCR（Real-time Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）及蛋白印迹实验（Western Blot,WB）检测感染慢病毒后各组细胞PGRMC2的m RNA及蛋白水平。3.通过流式细胞术（FCM）对各组细胞转染后其细胞周期变化情况进行检测。4.通过Transwell对各组细胞在感染慢病毒后的迁移变化进行检测。5.通过四唑盐比色法（MTT）对各组细胞在感染慢病毒后的增殖情况进行检测。结果:1.对各组细胞在进行慢病毒感染后72小时的荧光蛋白表达情况进行观察发现SKOV3及HO-8910阴性对照组以及实验组细胞的感染率均超过80%,空白组细胞没有观测到表达荧光蛋白。2.RT-PCR及Western Blot检测显示HO-8910-Si RNA中PGRMC2 m RNA及蛋白水平均水平显著低于HO-8910-NC组及HO-8910-Ctrl组（P＜0.05）;SKOV3-OE中PGRMC2 m RNA及蛋白水平均显著高于SKOV3-NC组及SKOV3-Ctrl组（P＜0.05）;SKOV3及HO-8910的NC组和Ctrl组之间的PGRMC2 m RNA及蛋白水平均无显著差异（P＞0.05）。3.流式细胞术检测显示:HO-8910阴性对照组及空白组细胞处于S期占比小于实验组;SKOV3阴性对照组及空白组细胞处于S期占比高于实验组,组间差异显著（P＜0.05）;SKOV3及HO-8910的NC组和Ctrl之间的细胞S期比例无显著差异（P＞0.05）。4.Transwell检测显示:HO-8910-Si RNA中细胞迁移数量多于HO-8910-NC组及HO-8910-Ctrl组;SKOV3-OE中细胞迁移数量少于SKOV3-NC组及SKOV3-Ctrl组（P＜0.05）;SKOV3及HO-8910的NC组和Ctrl之间的细胞迁移数量均无显著差异（P＞0.05）。5.MTT检测显示:HO-8910-Si RNA组细胞分别在24h、48h及72h的相对增殖率均高于HO-8910-NC组及HO-8910-Ctrl组;SKOV3-OE组细胞分别在24h、48h及72h的相对增殖率低于SKOV3-NC组及SKOV3-Ctrl组（P＜0.05）;SKOV3及HO-8910的NC组和Ctrl之间的相对增殖率无显著差异（P＞0.05）。结论:1.过表达PGRMC2基因可以抑制SKOV3卵巢癌细胞株的体外增殖与迁移能力;2.沉默PGRMC2基因可以促进HO-8910卵巢癌细胞株的体外增殖与迁移能力;3.PGRMC2基因对不同的卵巢癌细胞株的体外生长能力与迁移能力具有调节作用;4.PGRMC2基因可能对卵巢癌细胞周期具有调控作用。
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