乙酰基转移酶类毒素-抗毒素系统广泛分布于细菌染色体和质粒上,与质粒稳定遗传和持留态细胞形成有关。本课题组前期研究鉴定了肺炎克雷伯菌中的乙酰基转移酶类毒素-抗毒素系统KacAT,GNAT毒素KacT能抑制细菌生长,RHH抗毒素KacA能够中和KacT的毒性。KacA与KacT形成空间结构类似字母“W”型KacT2KacA4的异源六聚体,结合启动子区DNA并抑制转录。但是,RHH抗毒素蛋白能否与启动区DNA发生互作,GNAT毒素蛋白能否影响RHH抗毒素蛋白与DNA的结合,尚需阐明。本研究以肺炎克雷伯菌HS11286中的乙酰基转移酶类毒素-抗毒素系统KacAT为研究模型,探讨RHH抗毒素蛋白和GNAT毒素蛋白与启动子区DNA的互作机制。通过体积排阻色谱与多角度光散射技术（SEC-MALS）,本研究发现RHH抗毒素蛋白KacA以二聚体的形式存在于溶液中。体外凝胶迁移实验（EMSA）更表明,KacA蛋白与启动子区DNA具有一定的结合能力,其第8、12位的精氨酸残基在DNA结合中发挥关键作用。但是,借助lac Z报告系统开展的胞内转录实验的初步结果表明,KacA蛋白对kac AT启动子没有明显的抑制作用。本研究采用凝胶迁移实验在体外分析了抗毒素蛋白KacA、毒素蛋白KacT与启动子DNA的互作。发现毒素蛋白KacT能够通过与KacA抗毒素的C端结合影响抗毒素蛋白KacA与启动子区DNA的互作;低浓度KacT增加了KacA与DNA的结合强度,表明GNAT毒素蛋白能够调节RHH抗毒素蛋白与启动子区DNA的互作。综上所述,肺炎克雷伯菌乙酰基转移酶类毒素-抗毒素系统KacAT中的抗毒素KacA能够单独与启动子区DNA发生结合,毒素KacT通过结合抗毒素KacA进而改变KacA与DNA的结合强度。研究结果有助于我们进一步理解细菌乙酰基转移酶类毒素-抗毒素系统的转录调控机制和生理作用。