中国卤虫(Artemia sinica)是一种广泛生活在中国高盐水体中的小型甲壳动物,由于其发育速度快、胚胎具有独特的发育方式等特点,已经成为遗传学、胚胎学及分子生物学的主要实验材料,有重要的研究价值。卤虫具有极强的抗逆能力,在遇到不利环境时,其胚胎发育会停滞在原肠胚时期,形成特殊的滞育胚胎,当环境适宜并达到合适的孵化条件时滞育胚胎能解除滞育重新发育。磷酸化翻译起始因子e IF2α可以响应各种细胞应激反应,当细胞面临外部环境胁迫时,可通过e IF2α的Ser51位点的磷酸化来调控蛋白的合成,从而导致e IF2-GTP-Met-t RNAi三元复合物的合成减少并且减弱m RNA翻译。eIF2αk1是四种公认的磷酸化e IF2α的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶之一。eIF2αk1可响应各种应激条件(包括氧化应激,血红素缺乏,渗透压和热激等),在翻译起始水平抑制蛋白质合成。在不同的环境因子对中国卤虫的胁迫下及滞育胚胎的重启动过程中,As-eIF2αk1都发挥重要的作用,但其分子调控机制尚不清楚。在本研究中,首次采用RACE技术成功克隆得到了As-eIF2αk1 c DNA全长,长度为1447bp,包括969 bp的开放阅读框,编码氨基酸322个,298 bp的5’-UTR和150 bp的3’-UTR,蛋白分子量为36.5 KDa;生物信息学分析显示As-eIF2αk1主要定位于细胞核,为一个非跨膜的亲水性蛋白质;免疫荧光实验结果显示As-eIF2αk1在中国卤虫各发育时期的表达部位不存在组织或器官特异性;实时定量q PCR实验从基因水平对As-eIF2αk1相对表达量进行了分析,在卤虫胚胎发育过程中出现逐渐升高的趋势,发育到15h时该基因表达量最高,之后有下降趋势;Western blotting实验在蛋白水平对As-EIF2s1,As-ATF6,As-ATF4和As-EIF2αK1在中国卤虫不同发育阶段的表达量进行分析,结果显示该蛋白在卤虫滞育早期及拟成虫期表达量较高,与此同时,对在应对高盐、低温的环境胁迫下的蛋白表达水平高度上调,可能参与调控内质网应激反应;在si RNA实验中,实验组的中国卤虫胚胎出现显著的发育迟缓现象。实验结果显示,eIF2αk1在中国卤虫早期胚胎发育、滞育解除、蛋白质翻译调控和环境胁迫过程中发挥了重要的作用。本文分析了As-eIF2αk1在卤虫滞育胚胎重新启动和抵抗不良环境因子的分子调控机制中的作用,本研究对丰富卤虫胚胎滞育及重启动的理论、为其他动物滞育重启的分子机制的研究提供了科学依据,具有较为重要的理论意义,对开发卤虫蛋白资源具有潜在的应用价值。