酿酒酵母在缺乏营养的情况下进行减数分裂形成孢子,其孢子壁分为四层,由里到外分别是甘露聚糖,β-葡聚糖,壳聚糖以及二酪氨酸层。利用孢子壁的性质可将孢子制成微胶囊用来固定内源酶或者通过基因手段得到壳聚糖球体化学法固定外源酶,但是孢子遇到营养物质即开始萌发,破坏孢子的结构从而对微胶囊的应用不利。酿酒酵母孢子的萌发广泛认为分为两个阶段,在葡萄糖的诱导下进行第一阶段,但是萌发具体的机制至今尚不清晰,因此本文对酿酒酵母进行化学诱变,以此期望得到在萌发过程中有缺陷的菌株从而为上述应用提供工程菌,也为探究孢子萌发的机制。因此实验利用EMS对酿酒酵母进行化学诱变,凭借外层孢子壁对乙醚的抵抗性,筛选出萌发有缺陷的菌株。实验得出4株具有萌发缺陷的菌株,AN120-m5,AN120-m8,AN120-m10,AN120-m17。经过验证,它们均产孢正常,除了AN120-m5有轻微生长缺陷外,其余突变株均正常生长。四株突变株在液体培养基和固体培养基内均有较明显的萌发缺陷,其中AN120-m10的萌发率只有1%,而AN120-m5单个孢子在固体培养基上完全不萌发。实验进一步验证其突变是单基因突变,由于AN120-m5在固体培养基上的缺陷,不能获取杂交后代,而将其他三株突变株的单倍体和野生型交配三代后,发现野生型孢子萌发状况和突变型孢子呈2:2的优劣比例,推测突变株是单基因突变株的可能性很大。研究还探究了四株突变株中肌动蛋白(actin)在萌发过程中的定位,发现和野生型相比,有两株突变株呈现出不同的定位模式,从而判断出突变株发生的突变和actin有关系。实验得到的四株菌株由于推测是单基因突变菌株,因此为后续筛选确定突变基因打下基础,而由于通过验证推断至少有三个基因发生突变,对研究孢子萌发机制有利,也为后续构建完全不萌发菌株,从而为工业上微胶囊的利用提供工程菌。