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对本实验室收集到的40个拟青霉菌株进行了杀线虫活性筛选,并对菌株 Paecilomyces sp.YMF1.01761(以下简称1.01761)和Paecilomyces sp.YMF1.01788(以下简称1.01788)的杀线虫活性成分进行了研究,取得以下结果:
1.筛选获得6个菌株对全齿复活线虫有活性,11个菌株对松材线虫有活性,这是首次报道拟青霉对全齿复活线虫和松材线虫有致死活性。我们从中得到两个高毒力菌株:菌株1.01761和菌株1.01788。其中菌株1.01761的察氏固体培养的甲醇提取物在浓度为5mg/ml时对全齿复活线虫的24h致死率>95%,而菌株1.01788的改良萨氏液体培养滤液对松材线虫的24h致死率>90%。
2.平板生测显示了菌株1.01761作用于全齿复活线虫的全过程:首先菌丝分泌的毒素将线虫击倒;不久菌丝产生胞外酶破坏线虫的体壁屏障;之后菌丝侵入线虫体内并利用虫体营养生长繁殖。我们采用柱层析和重结晶的方法获得了该菌株的杀线虫毒素:ly-1,结构鉴定为4-(4-carboxy-2-ethyl-hydroxypentyl)-5,6-dihydro-6-methylcyclobuta[b]pyridine.-3,6-dicarboxylic acid,该结构未见任何文献报道。化合物ly-1对全齿复活线虫24h的50%致死率浓度为50.8 ppm,95%致死率浓度为292.8ppm.
3.菌株1.01788毒杀松材线虫的活性部位在多种有机溶剂萃取的水相,属于大极性成分,用硅胶、聚酰胺、LH-20凝胶柱层析和HPLC等方法进行分离,最终得到一个活性组分,茚三酮反应为阳性。该组分对松材线虫24h的50%致死率浓度为299.5ppm,95%致死率浓度为796.2ppm。
以上实验结果展示了拟青霉是一类具有潜力的线虫生防菌,不断收集和研究拟青霉菌株将会为线虫生防制剂的开发提供更为丰富的资源。