论文部分内容阅读
蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb(PM)是多部位药用的传统中药,由根、茎和叶组成,其块根称“何首乌”,藤茎称“夜交藤”,叶称“首乌叶”,不同部位的药理作用不同。目前,何首乌的质量评价多以有限成分为指标或进行简单的HPLC-UV指纹图谱分析,缺乏对何首乌各类代谢成分进行全面系统分析的手段与评价体系。目的:对广东道地药材何首乌不同部位进行代谢组学分析,从整体角度对其进行质量评价,为其资源利用及开发提供科学依据。方法:33个样品(根、茎、叶各11批)提取物进行UPLC-Q-TOF MS和NMR分析,建立何首乌不同部位的UPLC-Q-TOF MS和NMR标准指纹图谱,对所得图谱进行代谢物指认,并进行相似度分析;采用相应软件对图谱进行预处理得到大量数据,将数据进行归一化后,采用SIMCA-P软件进行化学计量学分析,筛选出何首乌不同部位间的生物标记物,选择含量变化较大的生物标记物作为指标成分;采用HPLC法分离制备夜交藤乙酰苯苷对照品,并用Quanlynx软件对指标成分进行含量测定,结合相对峰面积定量法,比较其在何首乌不同部位的差异。结果:UPLC-Q-TOF MS和NMR标准指纹图谱中共指认出化学成分57个,11批药材在两种分析方法下指纹图谱的相似度分别介于0.940~0.985、0.834~0.953、0.893~0.951(其中两批差异较大为0.734和0.765)之间和0.916~0.991、0.940~0.993、0.965~0.992之间;二苯乙烯苷、夜交藤乙酰苯苷、儿茶素、原花青素B、Emodin-1-O-β-D-glucoside、槲皮苷、金丝桃苷、大黄素、2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-(3″-O-monogalloylesters)-glucopyranoside、阿魏酸、苯丙氨酸、果糖和蔗糖为何首乌不同部位的生物标记物;分离得到的夜交藤乙酰苯苷纯度达到98%以上,指标成分含量测定结果表明根中二苯乙烯苷、大黄素和儿茶素含量较高,茎叶中槲皮苷、儿茶素和夜交藤乙酰苯苷含量较高,其中除儿茶素外,其它两类成分均在叶中有较高的含量。结论:本研究采用UPLC-Q-TOF MS和NMR植物代谢组学的方法对广东道地药材何首乌不同部位进行了质量评价,具有整体观和可量化的特点。两种分析方法下不同部位分别以相似度0.94、0.83、0.89和0.92、0.94、0.96为界,大于对应数值认定为合格药材,小于对应数值则为不合格药材。生物标记物中二苯乙烯苷、大黄素、儿茶素、槲皮苷和夜交藤乙酰苯苷含量变化较大,可作为何首乌不同部位的指标成分。首乌叶未列入药典,目前还没有其质量评价指标。化学计量学分析及含量测定结果表明药典规定首乌藤以二苯乙烯苷为质量评价指标是不合理的。根据实验结果,本研究建议将儿茶素、槲皮苷和夜交藤乙酰苯苷作为何首乌茎、叶质量评价的指标成分。