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【目的】筛选临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌(imipenen-resistantPseudomonas aeruginosa,IMPRPa),对其的耐药情况与Ⅰ类整合子的相关性进行研究。同时对该菌含Ⅰ类整合子并产金属酶的相关基因IMP-1及VIM-2进行分析,探讨Ⅰ类整合子及IMP-1、VIM-2基因对碳青霉烯类药物耐药性的影响。【方法】对临床所分离81株的IMPRPa和30株的非IMPRPa,采用MIC法测定耐药情况;用复合纸片法筛查IMPRPa产金属β-内酰胺酶的菌株;用聚合酶链反应(PCR)法对β类整合子基因(intI)和金属酶相关基因(IMP-1、VIM-2)进行检测,并对这两种基因进行测序确定,用SPSS11.5软件分析基因与耐药的相关性。【结果】1.在81株IMPRPa中,四环素(TE)的耐药率最高为100%;其次环丙沙星(CIP)、美洛培南(MEM)、庆大霉素(GN)、哌拉西林(PIP)耐药率均大于80%,耐药率居第二;左旋氧氟沙星(LEV)耐药率为77.8%;头孢比肟(FEP)耐药率为50.6%;阿米卡星(AMK)耐药率为38.3%;氨曲南(ATM)耐药率为35.8%;头孢他啶(CAZ)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)耐药率均小于30%;与非IMPRPa30株的耐药性比较分析,环丙沙星、氨曲南、美洛培南、庆大霉素、头孢比肟、左旋氧氟沙星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦8种抗菌药物的耐药率有显著性差异(P＜0.05)。2.111株(81株IMPRPa和30株非IMPRPa)铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子基因阳性率为69.4%(77/111),其中IMPRPa菌株中检出率为85.2%(69/81),非IMPRPa菌株中检出率为26.7%(8/30),PCR扩增产物经测序分析与GenBank序列同源性为99%一致。IntⅠ基因阳性的IMPRPa菌株与IntⅠ基因阴性IMPRPa菌株对环丙沙星、头孢他啶、头孢比肟、左旋氧氟沙星、哌拉西林5种抗菌药物的耐药率有显著性差异(P＜0.05)。ImⅠ基因在IMPRPa中与在非IMPRPa中的检出率有显著性差异(P=0.000)。3 IMPRPa中IntⅠ基因阳性菌株经复合纸片法检出产金属β-内酰胺酶15株;用PCR扩增出12株携带有blaVIM-2型基因,扩增产物经序列分析均为VIM-2型,blaVIM-2阳性菌株与blaVIM-2阴性菌株的耐药性比较无显著性差异(P＞0.05);均未扩增出IMP-1型基因。【结论】IMPRPa对常用抗生素耐药性强,与非IMPRPa的耐药性有显著性差异(P＜0.05),多重耐药现象十分严重,IMPRPa中Ⅰ类整合子的高携带率可能与亚胺培南耐药密切相关。本次试验中铜绿假单胞菌产金属酶的基因型主要为VIM-2型,IMPRPa中IntⅠ基因阳性菌株产金属酶VIM-2型的菌株对常用抗菌素的耐药率与不产酶的菌株并无明显差异,提示在本地区产金属酶VIM-2型不是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要机制。