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纳米磁性微球（Nano-Magnetic Particles,NMPs）是20世纪70年代后逐步产生、发展、壮大的一种应用前景广阔的新型磁性材料,由于其具有良好的磁响应性、粒径小、比表面积大、生物相容性好等优点而广泛地应用于生物技术各个领域,如细胞分离、靶向给药、免疫检测、蛋白质和核酸的分离纯化以及固定化酶等。本文对氨基磁性微球的制备、表征及固定化酶及其应用进行了研究。1.以改进的化学共沉淀法制备Fe3O4纳米微球。透射电子显微镜鉴定其粒径大小为6nm-12nm,粒径分布均匀且分散性较好;其饱和磁化强度为62.6emu/g,剩磁和矫顽力接近于0,具有超顺磁性;X射线衍射结果显示自制的Fe3O4属于立方尖晶石型结构;578cm-1和3421cm-1处强烈红外吸收光谱也和标准Fe3O4的特征吸收峰吻合。2.采用溶胶凝胶工艺,在醇水溶液中以氨水为碱催化剂,以自制的Fe3O4纳米微球为核,以正硅酸乙酯（TEOS）为前驱体,制备出包被Fe3O4/SiO2复合纳米磁球。复合纳米磁球直径大小为20nm-30nm左右,分散效果比较理想;饱和磁化强度为55.2emu/g,具有超顺磁性;X射线衍射图谱与标准Fe3O4图谱相一致,没有明显SiO2衍射峰的存在,说明包覆SiO2以无定型的形态存在。1097 cm-1和950 cm-1处红外吸收峰和标准SiO2图谱相吻合,说明SiO2成功与Fe3O4复合。3.以包被Fe3O4/SiO2复合纳米磁球为核,使用硅烷化试剂（APTES）制备了氨基磁性微球。其粒径大小约为40nm,饱和磁化强度50emu/g,具有超顺磁性;粒子表面富含氨基。4.将硅烷化氨基磁性微球用于固定化葡聚糖内切酶,探讨了葡聚糖内切酶的最佳固定化条件,以羧甲基纤维素钠为底物,研究了固定化酶的酶学性质和动力学参数。结果表明:当戊二醛浓度在3%,固定化时间为6小时,给酶量为600uL时,固定化酶的酶活最高;固定化酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为7.0,Km值为24.39mg/mL,酶活回收率为26.3%。重复使用5次后,固定化酶的酶活保持了原来的56.1%。5.另外将硅烷化氨基磁性微球用于固定化木瓜蛋白酶,同样探讨了木瓜蛋白酶的最佳固定化条件,并以酪蛋白为底物,研究了固定化酶的酶学性质和动力学参数。结果表明:当戊二醛浓度在5%,固定化时间为4小时,给酶量为10mg/g时,固定化酶的酶活最高;固定化酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH值为6.8,Km值为34.48mg/mL,酶活回收率为46.5%。重复使用10次后,固定化酶的酶活保持了原来的60.4%。固定化酶在热稳定性、pH稳定性和操作稳定性上较游离酶得到了一定的提高。6.将固定化木瓜蛋白酶用于水解绿豆分离蛋白以获得富含营养价值的绿豆多肽,对绿豆分离蛋白的水解度进行了检测。结果表明绿豆蛋白的水解度为8.5%,绿豆分离蛋白经固定化木瓜蛋白酶水解后,其性质得到了一定改善,更易于被肠道吸收。