重症急性胰腺炎大鼠胃窦肌间神经丛一氧化氮合酶阳性神经元的变化

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目的:初步探讨重症急性胰腺炎大鼠NOS阳性神经元在胃窦肌间神经丛的表达,探讨其在重症急性胰腺炎胃肠衰竭胃动力障碍发病中的机制,为临床治疗重症急性胰腺炎胃肠衰竭提供理论依据。方法:(1)雄性SPF级SD大鼠30只,随机分为假手术组10只、SAP组20只,SAP组采用逆向胰胆管微量泵持续注射5%牛黄胆酸钠造模,假手术组仅打开腹腔,找到胰腺后关腹。(2)两组造模后24h均灌入酚红糊剂,处死大鼠并洗脱酚红糊剂后比色,测其吸光度计算胃排空率。(3)采用消化道全程铺片技术制作胃窦标本,以Hu蛋白为神经元标志物,用NOS1(R-20)显示阳性神经元,采用双重免疫荧光染色法在荧光显微镜下观察并计数阳性细胞数,计算并比较NOS神经元阳性细胞所占百分比。(4)对胰腺进行病理评分。(5)用RT-PCR方法检测大鼠胃窦nNOS mRNA的表达结果:(1) 24h后假手术组均存活,SAP组均成功复制模型,胰腺炎组24h共死亡11只,其中6 h死亡2只,12 h死亡5只,24死亡4只。(2)胃排空率:假手术组:71.58±3.89%,胰腺炎组31.33±6.30%。(3)nNOS阳性细胞计数:假手术组nNOS阳性神经元细胞占神经元细胞的17.04±4.16% ,胰腺炎组nNOS阳性神经元细胞占神经元细胞的25.19±2.84%。(4)胰腺病理评分:假手术组1.7±0.7,SAP组: 15.6±1.2。(5)nNOS mRNA表达:假手术组0.7013±0.0129,SAP模型组胃窦nNOS mRNA表达增多0.8820±0.0151,采用独立样本的T检验,SPSS统计软件分析,两者间有统计学意义(P<0.05)。结论:重症急性胰腺炎可以引起大鼠胃窦部肌间神经丛的NOS阳性神经元数目增加,胃排空率降低。重症急性胰腺炎可能通过增加NOS阳性细胞数目来释放过多NO,通过肠神经系统,加重胃动力障碍。其具体机制可能为相关的神经递质基因的高表达。
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