【摘 要】
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黄芪多糖是黄芪的主要有效成分之一,具有抗氧化、增强免疫、抗肿瘤、抑菌等作用。对黄芪多糖进行分子修饰可大大提高多糖的生物活性或产生新的生物活性,同时也为进一步探索黄芪多糖构效关系提供理论依据。本论文旨在研究黄芪多糖铁、铜复合物制备工艺优化、结构表征及生物活性筛选。具体研究内容和结果如下:(1)在碱性条件下,黄芪多糖与三氯化铁合成制备黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物,产率为28.44±0.05%,采用FTIR、
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黄芪多糖是黄芪的主要有效成分之一,具有抗氧化、增强免疫、抗肿瘤、抑菌等作用。对黄芪多糖进行分子修饰可大大提高多糖的生物活性或产生新的生物活性,同时也为进一步探索黄芪多糖构效关系提供理论依据。本论文旨在研究黄芪多糖铁、铜复合物制备工艺优化、结构表征及生物活性筛选。具体研究内容和结果如下:(1)在碱性条件下,黄芪多糖与三氯化铁合成制备黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物,产率为28.44±0.05%,采用FTIR、UV-vis、TG-DSC、X-ray和SEM对黄芪多糖铁复合物进行表征,结果显示Fe3+与黄芪多糖复合成功。采用邻菲罗啉紫外分光光度法和ICP等离子体发射法测定了黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物中铁含量分别为:57.36±0.22 mg/g和53.95±0.17 mg/g。以芦丁为阳性对照,采用DPPH、ABTS、羟自由基清除能力和总还原力进行抗氧化试验,对APS和APS-Fe的抗氧化能力进行评价,发现APS和APS-Fe均具有一定的抗氧化能力,在试验设置浓度范围内其抗氧化能力呈现剂量依赖性关系,且APS-Fe的抗氧化能力稍低于APS。此外,NO含量检测结果显示APS、APS-Fe及三氯化铁能够刺激RAW264.7细胞释放NO,且呈剂量依赖性。APS-Fe在低浓度时具有极显著的促进作用(P<0.01),说明APS-Fe可以有效的激活巨噬细胞RAW264.7,从而发挥免疫调节作用。在同等浓度下,免疫调节活性大小依次为:APS-Fe>三氯化铁>APS。(2)采用化学法成功合成APS-Cu。通过单因素试验考察了黄芪多糖:硫酸铜比例、反应时间、pH值、反应温度对制备APS-Cu的影响,通过响应面法获得适宜制备工艺条件为:黄芪多糖:硫酸铜比例1:2.12,反应时间3.09 h,pH值7.54,反应温度80℃,此条件下理论复合物产率为153.46%,实际获得复合物产率为152.96±0.46%。抑菌活性筛选结果显示,APS-Cu的抑菌效果比APS的抑菌效果好,且APS-Cu对金黄葡萄球菌的抑制效果优于其他菌株。本实验以OD590值为指标,APS-Cu对金黄葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.625 mg/mL,对大肠杆菌的最小抑菌浓度为1.25 mg/mL,对沙门氏菌的最小抑菌浓度为1.25 mg/mL,对白色念珠菌的最小抑菌浓度为1.25 mg/mL。
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