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该研究以含有簇毛麦V染色体短臂(VS)的小麦-簇毛麦染色体代换系(6V/6A)、小麦-簇毛麦染色体易位系(6VS/6AL、6VS/6DL)、簇毛麦(VV)及不含有簇毛麦V染色体短臂(VS)的普通栽培小麦京411(AABBDD)、硬粒小麦(AABB)为供试材料,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术进行PCR扩增,利用105条S系列随机引物和100条Operon系列随机引物对上述六种供试材料的多态性进行了RAPD分子标记筛选分析.小麦-簇毛麦染色体代换系贵农21的抗性基因是Pm21,小麦-簇毛麦染色体易位系6VS/6AL、6VS/6DL中的6VS染色体也携带有抗白粉病基因Pm21.而且Pm21是目前对白粉病抗性最强的基因,它是由中国学者从簇毛麦中通过杂交而转移到栽培小麦中来的.通过细胞遗传学鉴定,Pm21位于簇毛麦的6V染色体上.该研究旨在建立小麦抗白粉病Pm21基因的分子标记,为进一步克隆该抗白粉病基因、进行小麦标记辅助育种选择提供理论依据.主要研究结果如下:1、建立RAPD最佳反应体系RAPD图谱对实验程序和条件的变化很敏感,PCR缓冲液、dNTP和Mg<2+>浓度、循环参数(退火温度、变温时间、PCR仪)、Taq酶、模板DNA含量、引物浓度等均可影响到RAPD的可靠性和可重复性.要获得重复性结果,应尽力使RAPD反应标准化,即在实验中首先摸索出RAPD反应体系中各组分的适宜浓度,并确保整个实验各次反应的各组分的来源和浓度保持一致. 该研究对模板DNA、Mg<2+>、TaqDNA聚合酶、引物等四个主要影响RAPD的因素设置了不同的浓度梯度,寻找扩增条带清晰的结果,确定了RAPD最佳的反应体系:即在25靗体系中,模板浓度为40ng,Mg<2+>浓度为3mM,引物浓度为1.0霱,Taq酶为1U,dNTP浓度为200霱.这一RAPD反应体系重复性和稳定性好.2、对小麦-簇毛麦染色体代换系(6V/6A)、小麦-簇毛麦染色体易位系(6VS/6AL、6VS/6DL)及簇毛麦(VV)、硬粒小麦(AABB)、普通栽培小麦京411(AABBDD)中的RAPD分析发现在105个S系列引物中,有85个引物扩增出较为清晰的RAPD谱带,出现频率为80.95％,检测到2042个基因位点,谱带数量最多的为8条,最少的为3条,平均为5条,分子量范围在0.5kb-3.0kb.在100个Operon系列引物中,均扩增出RAPD谱带,出现频率为100％,检测到2416个基因位点,谱带最多的为10条,最少的为2条,平均为6条,分子量范围在0.2kb-2.0kb之间.3、对位于簇毛麦V染色体短臂(VS)RAPD标记筛选发现在205个随机引物中有2个引物OPK08和OPW03在含有簇毛麦V染色体的四个材料中分别扩增出1条特异的谱带,而在普通栽培小麦和硬粒小麦中没有发现这条特异带.这一结果表明,由于在两个小麦-簇毛麦染色体易位系中均含有簇毛麦的VS,因此,可以推测这两个分子标记(OPK08和OPW03)是位于簇毛麦V染色体短臂(VS)上的.