中药丹参药材及其注射剂质量控制方法和大鼠体内代谢过程研究

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1、建立了丹参药材主要活性成分:丹酚酸类及二萜菲醌类成分的HPLC指纹图谱,采用对照品对照及HPLC-MS分析技术指认了指纹图谱中的主要成分.对指纹图谱分析方法进行了方法学考察,结果表明精密度、重现性及稳定性均符合要求,然后采用所建立的方法对收集到的40多份丹参药材进行了指纹图谱分析及相似度计算,结果显示主要栽培基地的丹参药材不论丹酚酸类还是二萜菲醌类成分的指纹图谱相似度均较高.2、采用C18色谱柱,恒组成洗脱,检测波长288nm,柱温30℃,建立了丹参药材中主要有效成分丹酚酸B的HPLC含量测定方法,测定了不同产地野生及栽培的丹参药材;采用中国药典方法测定了不同产地野生及栽培的丹参药材中丹参酮ⅡA的含量.建议增加丹酚酸B作为丹参含测指标,使质量评价指标更全面.3、采用HPLC-DAD及HPLC-MS方法建立了丹参注射液的化学指纹图谱及代谢指纹图谱,采用对照品对照及HPLC-MS分析技术指认了指纹图谱中的主要成分;除原儿茶醛外,丹参注射液中的其它成分均出现在静脉注射丹参注射液后的大鼠血浆中,但酚酸类成分的量发生了明显变化,随着给药时间的延长丹酚酸B在血浆中消除较快;丹酚酸D、丹酚酸A及紫草酸在血中消除速度较慢,说明多酚酸类成分可能是丹参注射液的主要药效成分.对不同企业丹参注射液酚酸类成分HPLC指纹图谱进行分析,结果表明:各企业丹参注射液HPLC指纹图谱的主要差别在于多酚酸类成分的种类及量.4、研究大鼠口服丹参总酚酸及尾静脉注射丹参注射液后,体液中的代谢产物,建立液液萃取与固相萃取相结合的生物样品前处理方法及线性梯度洗脱的HPLC-DAD分析方法;结合HPLC-MS分析技术及对照品对照方式,确定了五个代谢产物的结构,推测了丹参总酚酸在大鼠体内的代谢及排泄途径.5、建立了液液萃取血浆样品前处理方法,采用C18色谱柱建立了线性梯度洗脱,简便及重现性好的HPLC-UV分析方法,研究了大鼠口服丹参总酚酸后,丹酚酸B的药动学过程,表明丹酚酸B在大鼠体内吸收消除均较快,符合二室模型,属于一级动力学吸收及消除.
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