驱虫斑鸠菊不同提取方式与其药效作用机理的相关性实验研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guaiguainiu1
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目的:探讨新疆驱虫斑鸠菊不同提取方式与其药效作用机理的相关性。方法:(1)由驱虫斑鸠菊得到三种提取物,分别为水提取物Q1、丙酮萃取物Q2、萃取后物质Q3。(2)对Q1、Q2、Q3进行体外活性筛选,采用常规的MTT法测定不同提取物对B16小鼠黑素瘤细胞增殖的影响,L-DOPA氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响,NaOH裂解法检测黑素含量。(3)以C57BL小鼠为研究对象,观察体外筛选的活性提取物对小鼠皮肤颜色和毛囊的影响。(4)采用酶学和蛋白印迹杂交的方法,进一步探讨驱虫斑鸠菊提取物的作用机理。(5)对提取物进行谱效分析,将HPLC色谱峰与药效结果结合分析物质基础与药效作用的相关性。结果:(1)体外筛选实验表明:Q1、Q2、Q3三个提取物中Q1、Q2能够明显促进B16细胞增殖,Q1、Q3提取物对酪氨酸酶有不同程度的激活作用并促进黑素的合成,其中Q3在20-80μg.ml-1显著促进B16细胞黑素合成(P<0.01,与空白对照组比较)。(2)体内动物实验表明:驱虫斑鸠菊的提取物Q3在48.17mg.kg-1,96.34 mg.kg-1,192.68mg.kg-1可促进毛囊中黑素的合成,黑素颗粒伴随药物浓度的上升有不同程度的增加,其中192.68 mg.kg-1的提取物作用最为明显,近而表现为皮肤色素的加深。(3)酶学结果为Q3能够在无细胞体系中激活酪氨酸酶的活性,并能够在分子蛋白水平促进细胞中酪氨酸酶的表达。(4)通过HPLC对各提取物中成分物质基础的分析推断:1,2,3,4,5,11,16,17,19,20,21,23,25,26号峰对应的组分与细胞增殖的作用有关,而12,14号峰对应的组分与酪氨酸酶活性和黑素合成的作用有关。结论:驱虫斑鸠菊不同提取方式与其药效作用有一定的相关性,其中提取物Q3在体内和体外有很强的促进黑素合成的作用,初步推断其作用是通过酪氨酸酶的氧化活性及蛋白表达来实现的。通过提取方式与药效相关性研究显示出在天然药物的开发方面药效筛选与提取分离的结合对揭示生物活性部位有重要的探索意义。
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