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目的:①通过福尔马林-高渗盐胰蛋白酶-曲拉通液的技术流程来寻找摸索一种简便、高效的制备选择性脱细胞羊皮生物敷料的方法,通过对其镜下的检测、透气率的测定来进一步检测其制作效果及保湿性能;②通过对制备好的羊皮敷料消毒并进行细菌、真菌学检测,来寻找过氧乙酸消毒羊皮生物敷料的合适浓度;③通过选择性脱细胞羊皮生物敷料在深Ⅱ度大鼠烧伤创面上的应用及疗效的观察,探究其在创面愈合中的作用。
方法:①将健康无皮肤疾病的绵羊处死后,立即去毛、取皮,将皮分割成10cm×20cm大小皮片,运用福尔马林-高渗盐胰蛋白酶-曲拉通的技术流程制备选择性脱细胞羊皮生物敷料,运用常规组织学方法检测选择性脱细胞羊皮生物敷料的形态和细胞成份脱尽与否,通过透气率的测定,检验其与断层羊皮、完全脱细胞猪皮、完全脱细胞羊皮及单层纱布透气率的差异;②将选择性脱细胞羊皮生物敷料成品5份,每份切取2cm×2cm大小3块样品,分别由0.05%、0.25%、0.5%浓度的过氧乙酸消毒10分钟后,送检验科由专业人员行普通细菌培养及真菌培养,检测其消毒效果;③取96只Wistar大鼠,随机分作A(n=32)、B(n=32)、C(n=32)三组,在大鼠背部制作4%的深Ⅱ度烫伤创面,伤后在无菌的条件下分别用选择性脱细胞羊皮生物敷料、猪脱细胞真皮基质、0.5%碘伏纱布覆盖创面,打包后于伤后3天、7天、14天、28天四个时相点测量血液中血管内皮生长因子的含量,观察创面情况,并对创面进行组织学观察,计算14天、28天时创面的愈合率。
结果:①制备的选择性脱细胞羊皮生物敷料表皮完整存在,表皮与基底膜结合较紧,镜下见表皮层间有空隙,基底膜清晰,胶原结构完整,真皮层中未发现残留的细胞及碎屑;透气率实验证实选择性脱细胞羊皮生物敷料的保湿性能好,羊皮生物敷料的保湿效果总体优于猪脱细胞真皮基质;②过氧乙酸消毒的羊皮生物敷料,细菌和真菌培养均呈阴性,达到了消毒的目的;③伤后14天、28天,A组、B组的创面愈合率优于C组,A组和B组之间无差异,但在血清VEGF浓度、微血管计数等组织学观察上,创面愈合的早期和中期各项指标A组优于B组(P<0.05);
结论:①选择性脱细胞羊皮生物敷料具有较好的保湿性能;选择性脱细胞羊皮生物敷料的制备及过氧乙酸消毒方法具有可行性;②选择性脱细胞羊皮生物敷料能够促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合;③选择性脱细胞羊皮生物敷料安全、廉价、来源丰富,适合作为生物敷料使用。