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摘要:目的:确定野菊花的体外抗肿瘤活性部位与体外抗肿瘤活性成分,初步探讨其抗肿瘤作用机制,为进一步开发利用野菊花提供实验数据。方法:1.以70%乙醇为溶剂,65℃条件下加热回流提取野菊花总提物（chrysanthemum indicum extract,CIE）,依次使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对CIE进行萃取,得到野菊花石油醚部位提取物（Petroleum ether extract,PEE）、乙酸乙酯部位提取物（Ethyl acetate extract,EAE）、正丁醇部位提取物（N-butyl alcohol extract,NAE）,称重计算产率,同时采用一系列特征显色试验对不同极性部位的化学成分类型进行初步的理化鉴定。2.使用倒置显微镜观察法、CCK-8法检测CIE、PEE、EAE和NAE对人肺癌细胞A549、人慢性骨髓性白血病细胞K562、人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞Hep G2细胞形态和增殖的影响,Hoechst染色法、划痕实验法和Transwell小室法评价PEE、EAE、NAE对MCF-7细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响。3.根据野菊花抗肿瘤活性筛选结果,使用硅胶柱层析法结合薄层色谱法对PEE和EAE所含化学成分进行进一步分离,同时以MCF-7细胞增殖抑制活性为指标,筛选活性最强的分段产物。结果:1.从1 kg野菊花中提取得到CIE共392.2 g,产率为39.22%;用一系列有机溶剂萃取得到PEE共56.1 g,产率为5.61%,EAE共39.3 g,产率为3.93%,NAE共33.8 g,产率为3.38%。采用一系列特征显色试验对不同极性部位成分的化合物类型进行初步理化鉴定,其结果表明PEE在FeCl3（水溶液）反应、Dragendorff反应、Wager反应、Mayer反应、Molish反应、Liebermann-Burchard反应、Salkowski反应中呈现明显阳性;EAE在PAULY反应、FeCl3（醇溶液）反应、盐酸-镁粉反应、FeCl3（水溶液）反应、Molish反应、Liebermann-Burchard反应和Salkowski反应中呈现明显阳性。2.浓度超过150μg/mL的CIE、PEE、EAE和NAE对A549、K562和MCF-7细胞密度与形态影响明显,且在150-250μg/mL范围内对细胞增殖抑制作用呈量效相关性,PEE对MCF-7增殖抑制效果最显著;EAE对MCF-7的诱导凋亡作用、抑制迁移和侵袭作用较好。3.从PEE中分离得到了9个组分群P1-P9,从EAE中分离得到了6个组分群E1-E6,其中组分E1对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用最为明显。结论:1.野菊花提取物具有抗肿瘤活性,且对乳腺癌细胞MCF-7具有良好的体外抗肿瘤效果;2.野菊花抗肿瘤活性部位为石油醚极性部位和乙酸乙酯极性部位,其抗肿瘤作用机制可能与诱导肿瘤细胞的凋亡和抑制肿瘤细胞的迁移与侵袭有关;3.野菊花抗肿瘤活性最强的成分存在于EAE中以石油醚∶乙酸乙酯（70∶30）洗脱下的组分内。