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乙肝病毒(HBV)在世界范围内广泛流行,严重威胁人类的健康。MiR-122作为在肝细胞中含量最丰富的microRNA,已证实在脂类代谢、肝癌发生以及丙肝的复制过程中都发挥重要作用,但其对乙肝病毒复制的影响却鲜有研究。本研究主要采用miR-122 inhibior及mimic转染肝细胞来考察miR-122对HBV表达的影响。结果表明,在转染细胞中增加miR-122可抑制HBV复制,而抑制内源miR-122可促进HBV的复制。随后又发现miR-122可下调血红素氧化酶-1(HO-1),miR-122介导的HBV抑制效应可被其对HO-1下调而产生的影响部分消除;另外,miR-122可以下调cyclin G1,因而导致P53蛋白的上调,P53可通过与HBV的enhancer结合而抑制HBV的复制。研究表明,HO-1在miR-122抑制HBV复制中起负调控作用,而P53起正调控作用。本研究为利用miR-122治疗HBV感染提供了一定的理论依据。
Gp96是存在于内质网中膜上的HSP90家族的成员,在MHCⅠ类分子内源性抗原递呈过程中起辅助作用,而HBV-特异性T细胞反应在控制和清除病毒的过程中起重要作用。本研究室前期工作发现gp96作为免疫佐剂可诱导特异性T细胞反应,但对其抗病毒作用还尚未研究。因此本研究中我们考察了gp96在HBV转基因小鼠中介导的细胞免疫和体液免疫反应。研究结果发现,与只用病毒的两个主要结构蛋白HBsAg和HBcAg免疫的对照相比,采用gp96与HBsAg和HBcAg联合免疫可激发抗病毒T细胞免疫,HBcAg特异性细胞应答显著增加,肝脏中CD8+T细胞浸润增加,同时Tregs可降低30-40％。与空白对照相比,血清HBs水平可降低45%,血清HBV-DNA水平在最后一次免疫4周后降低达1000倍以上,肝脏中HBc阳性率降低达90%。因此,采用gp96与HBsAg和HBcAg联合免疫能够显著增强疫苗的抗病毒效果,gp96至少部分通过下调Tregs而发挥功能。本研究揭示了gp96在免疫调节中的新作用及其在慢性HBV感染免疫治疗中打破免疫耐受的潜在应用。