基于水滑石纳米片的电化学DNA传感器的探索研究

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在DNA传感器的研究中,DNA的固定化是一个关键性问题。通过改进DNA的固定化工艺,可以减少DNA固定步骤及固定过程中化学试剂的使用,提高DNA传感器的灵敏度。因此DNA的固定化对DNA传感器的性能及应用有着重大影响。将钴铝水滑石纳米片引入DNA传感器中,作为固定DNA的载体修饰于电极表面,利用其高比表面积和良好的导电性能,能够简化DNA固定方法,增加DNA固定量,增大DNA电极电流响应,降低检测限,提高检测的灵敏度,有利于将DNA电极发展成微量样品检测装置。本论文采用水滑石纳米片(LDHNS)作为固定DNA的载体,制备DNA/LDHNS修饰电极,构建电化学DNA传感器,并研究其检测性能。论文包括以下内容:1、采用LDHNS作为固定DNA的载体,在玻碳电极(GCE)表面固定鲱鱼精子DNA;制成的DNA/LDHNS/GCE在20μmol·L-1MB-50mmol·L-1Tris-HCl缓冲溶液中进行电化学行为的研究,该电极可以对缓冲溶液中存在的一定量苯酚进行检测,线性范围为4-20μmol·L-1,最低检测限为5 nmol·L-1;而DNA/LDHNS/GCE在缓冲溶液中有挥发酚类、胺类及无机盐等干扰物存在的时候(干扰物与苯酚浓度相等),其苯酚的峰电流受影响程度均不超过5%;DNA/LDHNS/GCE的重复性和稳定性良好,20次重复测试所得数据的相对标准偏差为1.2%,在室温下干态保存,1个月后电流响应为初始响应的92%,10个月后为初始响应的59%。2、采用LDHNS作为固定DNA的载体,在氧化铟锡电极(ITO)表面固定鲱鱼精子DNA;通过紫外.可见分光光度计检测发现,DNA牢固地固定在LDHNS层上,并且结构保持不变;在50 mmol·L-1Tris-HCl缓冲溶液和20μmol·L-1MB-50 mmol·L-1Tris-HCl缓冲溶液中对DNA/LDHNS/ITO的电化学行为进行研究,发现DNA/LDHNS/ITO电极可以对20μmol·L-1MB-50 mmol·L-1Tris-HCl缓冲溶液中存在的一定量苯酚进行检测,线性范围为8-48μmol·L-1;此电极对四甲基氢氧化铵(TMA)也有一定响应,响应范围为0-200μmol·L-1。DNA/LDHNS/ITO利用小分子与DNA的非共价作用对苯酚进行测试,利用烷化剂与DNA的烷化作用对TMA进行测试。DNA/LDHNS/ITO重复测试10次,所得数据的相对标准偏差为3.6%,在室温下保存,5个月后电流响应为初始响应的65%。
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