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内毒素血症是现代临床危重病医学面临的棘手问题,也是影响患者预后的重要因素。在内毒素血症中,心脏是最常受累器官之一。一旦出现心脏并发症,患者病情急剧恶化,死亡率会大幅度上升。由于内毒素血症发病机制复杂,目前临床上尚缺乏足够有效的治疗方法。因此,寻找各种有效的治疗方法,加强内毒素血症患者心肌保护变得至关重要。已酮可可碱是甲基黄嘌呤衍生物,是一种非选择性磷酸二酯酶抑制剂,是一种非特异性的外周血管扩张剂,可以降低血管阻力,改善脑和周围血循环。同时,可以改善红细胞变形能力,降低纤维蛋白浓度,抑制血小板聚集,改善缺血组织微循环环境,多用于治疗周围血管性疾病。现在,越来越多研究发现PTX具有选择性抗炎作用,对内毒素血症机体组织和细胞可以产生有益的保护作用。本研究建立大鼠急性内毒素血症模型,以已酮可可碱作为研究对象,观察心肌组织内NF-κB、I-κB、ICAM-1、HSP70的表达及血清TNF-α、IL-1β水平的变化,旨在探讨内毒素血症大鼠心肌损伤的发生机制及PTX在内毒素血症大鼠心肌损伤中的保护作用及机制,从而为临床PTX的应用提供理论依据。第一部分NF-κB、I-κB在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响目的:探讨NF-κB、I-κB在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响。方法:采用直接注射内毒素的方法建立大鼠急性内毒素血症模型。18只Wistar大鼠随机分成3组:①假手术组(S);②内毒素组(L);③PTX组(P)。内毒素组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后给予生理盐水对照(总剂量5 ml/Kg),用法同PTX组。PTX组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后在10min内静脉注入PTX(剂量10mg/Kg),注入完成后,通过微量输液泵泵注PTX(剂量15mg/Kg)维持50min。采用免疫组织化学法检测心肌组织NF-κB、I-κB蛋白,免疫印迹法检测心肌组织NF-κB蛋白,并观察各组大鼠心肌组织的病理形态。结果:内毒素组免疫组织化学法检测心肌组织NF-κB、I-κB蛋白水平与假手术组比较明显增强(P<0.01),免疫印迹法检测心肌组织NF-κB蛋白水平与假手术组比较也明显增强(P<0.01);予PTX干预后,免疫组织化学法和免疫印迹法检测心肌组织NF-κB蛋白水平与内毒素组比较明显减弱(P<0.01),而免疫组织化学法检测心肌组织I-κB蛋白水平与内毒素组比较无明显差异(P>0.05),内毒素组心肌组织的病理损害明显加重,PTX干预后,损害减轻。结论:NF-κB、I-κB均参与了内毒素血症心肌损伤的发生,PTX可以通过抑制NF-κB活化,减轻心肌损伤,保护心肌组织。第二部分血清TNF-α、IL-1β和心肌组织ICAM-1在内毒素血症大鼠中的变化及已酮可可碱的影响目的:探讨血清TNF-α、IL-1β和心肌组织ICAM-1在内毒素血症大鼠中的变化及已酮可可碱的影响。方法:采用直接注射内毒素的方法建立大鼠急性内毒素血症模型。18只Wistar大鼠随机分成3组:①假手术组(S);②内毒素组(L);③PTX组(P)。内毒素组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后给予生理盐水对照(总剂量5 ml/Kg),用法同PTX组。PTX组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后在10min内静脉注入PTX(剂量10mg/Kg),注入完成后,通过微量输液泵泵注PTX(剂量15mg/Kg)维持50min。采用放射免疫分析法检测血清TNF-α、IL-1β水平,免疫组织化学法检测心肌组织ICAM-1蛋白水平。结果:内毒素组放射免疫分析法检测血清TNF-α、IL-1β水平与假手术组比较明显增强(P<0.01),免疫组织化学法检测心肌组织ICAM-1蛋白水平与假手术组比较也明显增强(P<0.01);予PTX干预后,血清TNF-α、IL-1β水平与内毒素组比较明显减弱(P<0.01),免疫组织化学法检测心肌组织ICAM-1蛋白水平与内毒素组比较也明显减弱(P<0.01)。结论:血清TNF-α、IL-1β及心肌组织内ICAM-1参与了内毒素所致心肌损伤,PTX可以作用于TNF-α、IL-1β及ICAM-1,下调其水平,从而减轻LPS对心肌组织造成的损伤,保护心肌组织。第三部分热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响目的:探讨热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响。方法:采用直接注射内毒素的方法建立大鼠急性内毒素血症模型。18只Wistar大鼠随机分成3组:①假手术组(S);②内毒素组(L);③PTX组(P)。内毒素组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后给予生理盐水对照(总剂量5 ml/Kg),用法同PTX组。PTX组在10min内通过颈静脉注入内毒素5mg/Kg,其后在10min内静脉注入PTX(剂量10mg/Kg),注入完成后,通过微量输液泵泵注PTX(剂量15mg/Kg)维持50min。分别采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白。结果:内毒素组免疫组织化学法检测心肌组织HSP70蛋白水平与假手术组比较明显增强(P<0.01),免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与假手术组比较也明显增强(P<0.01);予PTX干预后,免疫组织化学法检测心肌组织HSP70蛋白水平与内毒素组比较明显增强(P<0.01),免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与内毒素组比较也明显增强(P<0.01)。结论:内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达可明显增高,PTX干预可以进一步增高内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达,从而进一步加强对心肌的保护。