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目的： 癌症是一类以细胞异常增殖为主要表型特征的恶性肿瘤疾病，其发病将严重影响人类健康、威胁人类生存安全。胃癌是一类源于胃粘膜上皮的消化道常见恶性肿瘤疾病，是仅次于肺癌和肝癌的第三大常见肿瘤人群，已成为人类健康和生存的主要杀手之一。 TIPE2是选择性地在免疫器官和免疫细胞高表达的免疫负调节因子，在人体生理免疫稳态维持方面发挥重要作用。TIPE2-/-小鼠能导致多器官的炎症，表现为白细胞增多，并对TLR和TCR过度敏感。在多种慢性炎症疾病如系统性红斑狼疮、儿童哮喘、慢性乙型肝炎中，人TIPE2的表达水平下调。TIPE2除了在淋巴组织等免疫系统中高表达外，在大多数非淋巴系统中亦具有不同程度的表达。我们在前期对胃癌临床样本的研究发现，与正常的胃粘膜组织相比，TIPE2在胃癌组织中的表达量下调或缺失，提示TIPE2可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。 为了明确TIPE2在人胃癌发生发展中的作用，阐明其作用机制，为以TIPE2为抗肿瘤靶点药物的挖掘和开发提供新的思路和理论依据。本论文以胃癌为研究对象，通过一系列细胞和生物学技术手段探讨TIPE2与生长通路PI3K/AKT、TIPE2与细胞周期、TIPE2与Caspase凋亡通路以及TIPE2与NF-κB信号通路等的关系，明确TIPE2与胃癌的关系，阐述TIPE2如何通过生长、凋亡和炎症等通路达到抑制肿瘤的目的。 方法： 1.TIPE2在胃癌组织及癌旁正常胃粘膜组织中的表达:收集42例胃癌组织和癌旁正常胃粘膜组织样本进行总RNA提取，通过RT-PCR方法检测TIPE2mRNA在胃癌组织和癌旁正常胃粘膜组织中的表达;收集63例标本库中胃癌患者的癌组织及癌旁组织样本，利用免疫组织化学法检测TIPE2蛋白在胃癌组织和癌旁正常胃粘膜组织中的表达。 2.TIPE2对细胞增殖的影响:由于TIPE2在胃癌细胞中的表达量很低，为了探讨TIPE2在胃癌中的作用，通过病毒感染的方法，构建慢病毒介导的TIPE2过表达胃癌细胞株;对构建好的TIPE2过表达胃癌细胞株通过CCK-8试剂盒以及Edu实验检测细胞增殖，观察TIPE2对细胞增殖的影响。利用Western bolt的方法检测增殖相关信号通路PI3K-AKT和Ras-Raf-MEK-ERK1/2中关键蛋白AKT、ERK1/2及其磷酸化的表达水平，研究TIPE2影响细胞增殖的分子机制。 3.TIPE2对细胞周期的影响:通过PI染色应用流式细胞仪检测TIPE2对细胞周期的影响;利用Western bolt的方法检测细胞周期相关蛋白的表达，探讨TIPE2调控细胞周期的机制。 4.TIPE2对细胞迁移的影响:采用细胞划痕实验检测TIPE2是否影响胃癌细胞的运动能力。 5.TIPE2对细胞凋亡的影响:采用PI-AnnexinⅤ双染的方法应用流式细胞仪检测细胞凋亡，并利用Western bolt的方法检测凋亡相关蛋白的表达，探讨TIPE2促进细胞凋亡的机制。 6.TIPE2对炎症相关因子的影响:采用双报告基因检测TIPE2对LPS诱导的NF-κB活化的影响;通过ELISA检测相关炎症因子的表达。 7.TIPE2对LPS诱导的细胞增殖的影响:在TIPE2干扰稳定细胞株中检测LPS诱导后对细胞增殖的影响。 结果： 1.对胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织样本进行RT-PCR及免疫组织化学法检测TIPE2的表达，结果显示，TIPE2在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常胃粘膜组织。 2.建立了TIPE2过表达的胃癌稳定细胞系，慢病毒介导的TIPE2过表达能抑制胃癌细胞的增殖，并上调p-AKT和p-ERK1/2的表达。 3.TIPE2过表达使细胞周期阻滞在G2/M期，下调CDK1和CyclinB1的表达水平，并上调p-CDK1蛋白的表达。 4.TIPE2过表达后，能够明显抑制胃癌细胞的迁移，上调E-cadherin的表达，下调N-cadherin和Vimentin的表达。 5.TIPE2过表达后能促进胃癌细胞的凋亡，抑制Bcl-2的表达，上调caspase-9和Caspase-3的活性切割蛋白的表达。 6.LPS能反馈性地上调TIPE2的表达，而TIPE2能够抑制LPS诱导的NF-κB的活化，并抑制LPS诱导的炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的表达。 7.TIPE2干扰促进LPS诱导的细胞增殖。 结论： 1.TIPE2在胃癌组组织中的表达量降低或缺失，可能与胃癌的发生发展有关。 2.TIPE2通过抑制磷酸化的AKT和磷酸化的ERK抑制PI3K-AKT和Ras-Raf-MEK-ERK1/2信号通路从而抑制胃癌细胞的增殖。 3.TIPE2通过下调CDK1和CyclinB1的表达并上调p-CDK1蛋白的表达引起G2/M期阻滞。 4.TIPE2对胃癌细胞的迁移抑制可能是通过调控EMT过程来完成的。 5.TIPE2抑制Bcl-2的表达，上调Caspase-9和Caspase-3的活性切割蛋白的表达量从而促进内源性细胞凋亡。 6.TIPE2抑制LPS诱导的NF-κB的活化并抑制炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的表达，并抑制LPS诱导的细胞增殖。