目的:研究双孔钾离子通道 TRESK(TWIK-related spinal cord K+channel,TRESK)在炎性痛模型大鼠三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)中的表达变化及其疼痛调节作用,明确上游刺激因子2(upstream stimulatory factor2,USF2)通过调节TG神经元TRESK表达和功能,参与疼痛调控的表观遗传机制。方法:1)大鼠左侧须垫部区域皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立面部炎性痛模型。应用von Frey检测大鼠面部机械痛阈值变化。2)应用western blot、RT-qPCR及免疫荧光染色方法,检测TRESK和USF2在大鼠TG中的表达分布和造模前后的表达变化。3)应用电生理方法,研究造模前后大鼠中小直径TG神经元TRESK电流的改变。4)应用转录因子预测软件AliBaba2.1及分子克隆实验、双荧光素酶报告基因分析与RT-qPCR筛选出调控TRESK基因表达的转录因子。5)TG内定位注射慢病毒质粒过表达TRESK,以及TG内注射化学修饰的TRESK siRNA及USF2 siRNA,干扰TRESK或USF2,研究其在疼痛调控中的作用。6)应用双荧光素酶报告基因分析USF2与TRESK基因启动子区的结合,验证USF2对TRESK基因转录的抑制作用。结果:1)术后1d,CFA模型大鼠面部机械痛阈值显著下降,并持续到术后第10d。2)CFA模型大鼠TG中TRESK mRNA水平及蛋白表达明显降低,并且TRESK电流密度显著下降,拉莫三嗪(lamotrigine,TRESK抑制剂)敏感电流的比例显著降低。3)大鼠TG中,TRESK在NeuN标记的神经元中大量表达,并且主要分布在与疼痛相关的CGRP及IB4标记的中小直径神经元中,与NF-200标记的大直径神经元共标较少,在GS标记的胶质细胞中不表达。4)TG内定位注射TRESK siRNA后,TRESK通道表达显著降低,正常大鼠面部机械痛阈值明显下降,表现出痛觉过敏反应。5)TG内定位注射LV-TRESK后,TRESK表达明显上升,CFA模型大鼠的面部机械痛阈值也明显回升,缓解了痛觉过敏。6)TRESK启动子荧光素酶截短体构建以及双荧光素酶报告基因实验提示可能存在能够负性调控TRESK表达的转录因子。7)生物信息软件预测与RT-qPCR结果提示转录因子USF2可能调控TRESK的表达。8)免疫荧光结果显示大鼠TG中USF2与TRESK大量共标,蛋白电泳结果显示CFA模型大鼠TG中USF2表达升高。9)双荧光素酶报告基因结果显示USF2可以通过结合位点与TRESK基因启动子区结合,并且验证了 USF2对TRESK表达存在负性调控作用。10)CFA模型大鼠TG中定位注射USF2 siRNA,翻转了 CFA大鼠TG中TRESK的表达变化,使得TRESK表达升高,TRESK电流密度增大,并且大鼠面部机械痛阈值回升,缓解了痛觉过敏反应。结论:在炎性疼痛大鼠TG神经元中,TRESK的表达下降,参与炎性疼痛调控。转录因子USF2通过负性调控TRESK的表达及功能,参与痛觉调控。