螺旋藻多糖对小鼠角膜新生血管的治疗作用

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[目的]  观察螺旋藻多糖(PSP)对小鼠角膜新生血管(CNV)的作用,探讨其作用机制。  [方法]  1.140只小鼠制作右眼角膜碱烧伤模型,分为A、B、C、D四组,每组右眼分别滴浓度为0.05%、0.1%、0.5%的PSP滴眼液和生理盐水。  2.各组于碱烧伤后1,3,7,10,14,21,28天观察小鼠角膜混浊度,CNV生长情况并计算其面积,拍照记录。  3.各组于碱烧伤后1,3,7,10,14,21,28天随机取5只小鼠处死,取角膜,对半均分,一半石蜡包埋切片,苏木精-伊红(HE)染色计数炎症细胞数,免疫组织化学法检测CXC趋化因子受体1(CXCR1)和C-C趋化因子受体2B(CCR2B)在角膜组织中的表达水平,一半酶联免疫吸(ELISA)法测定白细胞介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的含量。  [结果]  1.CNV面积  第7、14、21天,A>C,D>B,D>C,(P<0.05);10天时,D>B>C(P<0.05);第3、28天,D>C(P<0.05)。  2.角膜浑浊度  第1、3、7天,4组无明显差异(P>0.05);第10、14天,B、C两组明显低于D组(P<0.05);第21天,C<B<A<D(P<0.05)。  3.炎症细胞计数  第1、3天,A、B、C三组炎症细胞计数均明显小于D组(P<0.05);第7天时,B、C组均小于A组(P<0.05),B、C两组无明显差异(P>0.05);10天时,C组小于A、B组(P<0.05),A、B两组无明显差异(P>0.05);14天时,D>A>C(P<0.05);28天时,D>A>B>C(P<0.05)。  4.IL-8和MCP-1的含量  碱烧伤后第7天,各组IL-8含量达高峰,第1、21天,B、C组均低于D组,差异有显著性(P<0.05);第3、7天,A、B、C三组明显低于D组(P<0.05);10、14、28天时A<B<C<D,差异有显著性(P<0.05)。碱烧伤后第7天,各组角膜中MCP-1达高峰,第1天,C组明显低于A、D组(P<0.05),A、D两组无差异(P>0.05);第3、10、28天,A、B、C三组均低于D组(P<0.05);第7、14天,A<B<C<D,差异有显著性(P<0.05);21天时,C<B<A,B、C两组均小于D组(P<0.05),A、D两组无差异(P>0.05)。  5.CXCR1和CCR2B的表达情况  第1天CXCR1蛋白表达的平均光密度(AOD)值四组无显著差异(P>0.05);第3、10、21、28天,C<D组(P<0.05);第7天,C组低于A、B、D三组(P<0.05),A、B、D三组间无差异(P>0.05);14天时,C组明显低于A、D两组(P<0.05),A、D两组间无差异(P>0.05)。第1、3天,C组CCR2B蛋白表达的AOD值低于D组(P<0.05);第7天时达高峰,C组低于A、B、D三组(P<0.05),A、B、D三组无差异(P>0.05);第10、14、21天,C组低于A、D两组(P<0.05),A、D两组间无差异(P>0.05);第28天,B、C组均低于D组(P<0.05)。  [结论]  PSP通过减轻炎症反应,有抑制CNV的作用,浓度为0.5%时,疗效最显著。
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