【摘 要】
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牡丹籽蛋白水解物是从牡丹籽粕中提取的天然活性成分。本课题探究了牡丹籽蛋白水解物对镉和特非那定诱导的斑马鱼损伤的保护作用及机制,并探究了牡丹籽蛋白水解物对猪油品质的保护作用。试验结果如下:(1)通过建立镉诱导的斑马鱼胚胎发育损伤模型,研究牡丹籽蛋白水解物的保护作用。结果显示,75μg/m L牡丹籽蛋白水解物可显著提升镉诱导的斑马鱼胚胎的孵化率和存活率(P<0.05),并显著降低胚胎的畸形率特别是脊柱
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牡丹籽蛋白水解物是从牡丹籽粕中提取的天然活性成分。本课题探究了牡丹籽蛋白水解物对镉和特非那定诱导的斑马鱼损伤的保护作用及机制,并探究了牡丹籽蛋白水解物对猪油品质的保护作用。试验结果如下:(1)通过建立镉诱导的斑马鱼胚胎发育损伤模型,研究牡丹籽蛋白水解物的保护作用。结果显示,75μg/m L牡丹籽蛋白水解物可显著提升镉诱导的斑马鱼胚胎的孵化率和存活率(P<0.05),并显著降低胚胎的畸形率特别是脊柱弯曲率(P<0.05)。这些结果表明,牡丹籽蛋白水解物对镉诱导的斑马鱼胚胎发育损伤有良好的保护作用。(2)探究了牡丹籽蛋白水解物对镉诱导的斑马鱼胚胎发育损伤的保护机制。结果显示,牡丹籽蛋白水解物可降低镉诱导斑马鱼胚胎的丙二醛(MDA)浓度,提升总抗氧化能力(T-AOC)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比率和抗氧化酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和谷胱甘肽过氧化物酶GPx)活力及相关基因(Mn-SOD、CAT和GPx1a)的表达水平。牡丹籽蛋白水解物可下调镉诱导斑马鱼胚胎的炎症相关基因(TNF-α、IL-1β和IFN-γ)和凋亡相关基因(C-jun、Caspase-3和Caspase-9)的表达。这些结果表明,牡丹籽蛋白水解物可通过减轻氧化应激、炎症及细胞凋亡,减轻镉诱导的斑马鱼胚胎发育损伤。(3)对牡丹籽蛋白水解物进行超滤分离,得到分子量>30 k Da、10-30 k Da、5-10 k Da、3-5 k Da和<3 k Da五种超滤组分。通过建立特非那定诱导的斑马鱼胚胎心脏损伤模型,研究牡丹籽蛋白水解物包括混合组分和五种超滤组分的保护作用。结果显示,各组分牡丹籽蛋白水解物均可降低特非那定诱导的斑马鱼胚胎的心脏畸形率,缩小心包面积和静脉窦(SV)-动脉球(BA)间距,并提升心率。混合组分和分子量5-10 k Da组分的牡丹籽蛋白水解物可显著上调特非那定诱导的斑马鱼胚胎心脏转录因子(Nkx2.5、Tbx5和Gata4)和氧化应激相关基因(Mn-sod、Cat、Gstp2、Nqo1和Nrf2)的表达(P<0.05)。同时,混合组分和分子量5-10 k Da组分的牡丹籽蛋白水解物可上调特非那定诱导斑马鱼胚胎的Mdm2和Bcl-2表达,并下调P53、Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达。这些结果表明,各组分牡丹籽蛋白水解物,特别是混合组分和分子量5-10 k Da组分可通过调节心脏转录因子、氧化应激和细胞凋亡来保护特非那定诱导的斑马鱼胚胎心脏损伤。(4)使用烘箱法处理猪油,研究牡丹籽蛋白水解物混合组分和五种超滤组分对猪油品质的保护作用。结果显示,分子量5-10 k Da、3-5 k Da、<3 k Da组分牡丹籽蛋白水解物处理的猪油感官评价结果与2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)相当。分子量5-10 k Da组分对猪油过氧化值的抑制效果最好,当贮藏时间为25天时,过氧化值仅为0.0241 mmol/kg,低于BHT(0.0245 mmol/kg)。分子量5-10 k Da组分对猪油碘值的下降也有最好的抑制效果。分子量10-30 k Da组分对猪油酸价的抑制作用最好。除了10-30 k Da组分,所有组分的牡丹籽蛋白水解物对猪油丙二醛的增加均有明显的抑制效果(P<0.05)。这些结果表明,牡丹籽蛋白水解物对猪油贮藏期间的品质有良好的保护作用。在所有组分中,分子量5-10 k Da组分有最好的抗油脂氧化能力。
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