纤维材料固定化丙酮丁醇梭菌发酵产丁醇的研究

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本文通过采用经过预处理的纤维材料CTF作为固定化材料来吸附固定化丙酮丁醇梭菌达到经济、高效地发酵生产丁醇的目的,并在此过程中探索了以廉价生物质玉米芯水解液为底物发酵产丁醇的可行性,其主要研究内容如下:  首先,通过查阅国内外相关文献并结合课题的需要从四大固定化方法(吸附法、包埋法、共价结合法和交联法)中选定了纤维类材料吸附固定化法,然后又通过对比各类纤维材料的扫描电镜图并设计、验证实验,最终从各类纤维材料(天然纤维和合成纤维)中筛选出了一种较佳的细胞固定化纤维材料—CTF,并且找到了合适的预处理方法。  其次,考察了丙酮丁醇梭菌以固定化和游离两种状态形式分别分批发酵不同碳源及其对应的不同初始底物浓度时丁醇在产量、得率和生产效率上的差别,结果发现固定化细胞在各方面均优于游离细胞:以60 g/L的葡萄糖为底物时,固定化细胞在丁醇的产量、得率和生产效率上分别比游离细胞高出28.4%、7.14%和133%;以60g/L的木糖为底物时,固定化细胞比游离细胞分别高出18.2%、0%和38%;以60g/L的混合糖为底物时,固定化细胞比游离细胞分别高出28.3%、5.5%和69.4%。实验结果证实固定化细胞可以显著地提高发酵液中最终丁醇的浓度、得率并且能够明显地缩短发酵周期从而大大地提高丁醇生产效率。混合糖发酵实验表明葡萄糖是丙丁梭菌发酵的速效碳源,木糖的利用呈现出“二次消耗”的现象。此外还进一步考察了分别以葡萄糖和木糖为底物时的固定化丙酮丁醇梭菌反复分批发酵产丁醇的稳定性,结果发现以葡萄糖为底物时的固定化丙丁梭菌反复分批发酵产丁醇的稳定性明显高于木糖。  最后,从降低生物丁醇的产业化成本角度考虑,探讨了固定化丙酮丁醇梭菌发酵廉价生物质玉米芯水解液产丁醇的可行性,然而高效液相色谱图谱发现玉米芯酸水解液中存在多种抑制性物质(如呋喃类、酚酸类及乙酸),这些抑制性物质的存在严重地抑制了菌体的生长代谢及丁醇的产生,因此,进一步考察了各类抑制性物质对丙丁梭菌发酵产丁醇的毒害作用强弱,为建立解除玉米芯水解液毒性的方法提供依据。
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