第一部分糖尿病合并烫伤大鼠模型的建立[目的]建立Wistar大鼠糖尿病模型,在其体表制作出占其体表面积10%的深Ⅱ度烫伤。[方法]采用STZ腹腔注射的方法制作糖尿病大鼠模型,采用控制热水温度以及烫伤时间的办法来制作其深Ⅱ度烫伤模型。[结果]制作的糖尿病大鼠模型血糖稳定,浓度都大于16.7mmol/L,且出现糖尿病的症候群,通过免疫组化及HE染色技术证明胰岛细胞的分泌减少,部分细胞已经被破坏。深Ⅱ度烫伤模型制作可复制性强,HE染色证明皮肤表层被破坏,真皮下组织完整,残留腺体的上皮细胞,形成有上皮小岛。[结论]与其他糖尿病模型制作方法比较,腹腔注射STZ具有重复性好,实验步骤简单,操作方便,结果可靠,且操作过程易于量化和标准化,模型稳定。控制热水温度和烫伤时间来制作深Ⅱ度烫伤有使用物品简单,过程易操作,重复性强,模型稳定的优点。第二部分局部联合应用胰岛素和rhEGF在创面修复过程中对基质及细胞因子的作用[目的]探讨胰岛素和rhEGF联合应用在糖尿病合并烧伤创面愈合的过程中对于基质和细胞因子的作用,以及这些作用与创面愈合的关系。[方法]①把制作好的糖尿病合并烫伤大鼠模型清创以后随机分为四组,分别是：空白对照组(A组),创面使用生理盐水；胰岛素组(B组),创面应用胰岛素进行局部浸润注射；外喷rhEGF组(C组),创面外喷适量rhEGF；胰岛素和rhEGF联合应用组(D组)：创面应用与胰岛素组等剂量的胰岛素局部浸润注射,并且外喷与rhEGF组同等剂量的rhEGF。用药以后创面进行包扎。②在创面愈合过程中不同时相点检测OHP含量(样本碱水解法)、TGF a含量(原位杂交)和VEGF含量(ELISA)。③在创面愈合过程中与上述相同的时相点,检测各组创面愈合率以及VEGF的分布(抗VEGF抗体的免疫组化)。[结果]①B组和C组不同时相点创面愈合率差异不大,D组创面愈合率在不同时相点都要高于其余三组。②B、C、D组OHP含量在不同时相点都高于A组,且D组与B、C组在不同时相点都存在差异(P<0.05)。③TGFQ含量在B、C、D组都有适当的提高,对照组明显低表达,D组在不同时相点的表达与B、C组有差异(P<0.01)。④VEGF主要分布在血管内皮细胞及创面基底部,D组在高水平维持时间较长,与B、C组之间存在差异(P<0.05),B、C、D组的维持水平浓度、峰值出现时间均优于A组,B、C组间差异不甚明显。[结论]①在用胰岛素控制局部血糖情况下,外用rhEGF能明显加速糖尿病烧伤创面愈合,这一方面可能是补充了创面本身刺激因子不足,另外一方面血糖的控制也能上调受体的表达,促进愈合。②彻底地清创和包扎对于rhEGF可以增加其接触时间,局部浸润注射胰岛素也减少其挥发,持续作用,为rhEGF发挥作用提供良好的环境。③联合使用rhEGF和胰岛素在糖尿病创面愈合过程中,可以协调调控创面愈合中胶原的代谢。④局部血糖控制后,rhEGF刺激可以增加其它细胞因子的表达,加速创面新生血管形成,再上皮化,早日封闭创面,协调促进创面愈合。⑤糖尿病性创面难愈可能与高糖环境中,某些细胞因子受体表达过低或者受到抑制,再上皮化以及新生微血管障碍等诸多方面有关系。