【摘 要】
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酸性成纤维细胞生长因子是成纤维细胞、血管内皮细胞、神经细胞等多种细胞的重要生长因子.该文通过PCR扩增引入点突变,使编码aFGF的cDNA序列在起始密码ATG后的前50个碱基均成
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酸性成纤维细胞生长因子是成纤维细胞、血管内皮细胞、神经细胞等多种细胞的重要生长因子.该文通过PCR扩增引入点突变,使编码aFGF的cDNA序列在起始密码ATG后的前50个碱基均成为原核细胞的偏受密码子;同时采用pKK223-3和pET-28a两种原核系统表达重组的aFGF,结果重组人aFGF在pET-28A原核系统中得到成功而高效的表达,但在pKK223-3原核系统未得到满意表达.实验中还观察到降低诱导后培养温度可增加可溶性人aFGF蛋白的表达量,并未明显影响重组人aFGF总的表达量.肝素亲和层析的结果显示原核表达的重组人aFGF可与肝素特异性结合.该文通过多项生物学活性研究证明pET-28a原核系统表达的重组人aFGF具有较高的天然人aFGF的生物学活性.神经细胞粘附分子样蛋白是本课题组在前期工作中从人胎肝cDNA文库中获得的一种新基因,其编码的多肽在氨基酸水平上与人神经细胞粘附分子又名CD56分子有27﹪同源性.该文用NCAML免疫小鼠,结果发现核酸免疫后小鼠NK细胞杀伤活性明显增强.该文采用C3d作为免疫佐剂,将NCAML与三个C3d首尾相连,并将此重组DNA片段定向克隆入真核表达载体pcDNA3,从面增强NCAML核酸免疫后的机体免疫应答.此外,该文不成功地构建了吉林双阳梅花鹿主动脉的PCRcDNA文库,并从中获得了三个EST标签.
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