恶性胶质瘤细胞诱导内皮细胞体外三维成型特性和诺帝抑制作用的研究

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在肿瘤组织微环境中内皮细胞增殖、迁移以及管型的形成构成了实体瘤血管生成的基本过程,抗血管生成的研究是目前肿瘤学研究的热点之一。恶性胶质瘤血管生成极其活跃,血管内皮细胞增生随恶性程度增加而增加,因此深入研究胶质瘤血管生成机制对于揭示肿瘤血管生成的机理具有重要的意义。脂氧化酶抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid, NDGA)是从常青灌木Larrea divaricata和Guaiacum offrcinale中提取的一种天然成分,具有多种生物学功能,尤其是在抗肿瘤治疗的作用倍受人们的关注。我们根据NDGA的化学结构自行合成了其制剂诺帝,并发现它不但具有显著的抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞分化,抑制bFGF的表达的作用,而且能减低移植瘤和实验性胶质瘤的微血管密度,但其机理尚不十分清楚。本研究旨在通过建立体外小管样结构的形成模型,并在此模型中研究、探讨诺帝对人恶性胶质瘤诱导血管生成及抑制作用的机理。主要研究内容和结果如下:1.以胶原作基质、以恶性胶质瘤细胞为诱导,构建了内皮细胞体外三维成型模型并研究了其特性将内皮细胞系ECV304接种于鼠尾胶原作基质的培养基上,并以恶性胶质瘤细胞系SHG-44培养上清为诱导物,建立了恶性胶质瘤细胞诱导的内皮细胞体外三维成型模型;对比观测了诱导组与非诱导情况下(三维培养组)内皮细胞小管样结构形成情况,并定量检测管型各种参数。结果显示,ECV304细胞呈现FVIIIRAg和CD34阳性表达;诱导组内皮细胞通过芽生、连接和相互围绕形成小管样结构;形成管样结构的数量从2d开始分别是(2.5±1.0,6±1.63,12.4±3.42,15.5±1.92,19±2.58,23±2.0,27±2.52)明显多于培养组(0,1.5±0.4,2.5±0.8,4.1±1.13,6.5±1.5,7.6±2.4,9±2.77),P<0.01,而且管型形成时间早而快。诱导组内皮细胞形成的管样结构管外径(602.45±47.93)、管腔内径(412.76±51.85)以及管长度(768.82±146.28)都显著大于三维培养组(452.23±43.55 ,226.35±34.26,368.25±35.26),P<0.01。
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