胶质瘤是最为常见的脑部肿瘤,约占原发性神经系统肿瘤的60%,其发病率存在明显的性别差异,男性发病率是女性的1.85倍。胶质瘤具有复发率高、治疗效果不佳,预后极差等特点,多数患者的生存期一般小于一年。目前,针对胶质瘤的治疗方法主要是手术切除,然后辅助以放疗、化疗,但是三种方法结合也仅能极其有限地延长病人的生存期。对于胶质瘤的治疗,近年来越来越多的研究小组将研究方向转向靶向药物的研究,而靶向药物的研究最根本的是寻找治疗疾病的靶标。因为胶质瘤在男女中的发病率存在明显差异,我们推测雌激素受体可能在胶质瘤的发生发展中发挥特定作用。雌激素受体-α36(estrogen receptor-α36,ER-α36)是一种新型雌激素受体,其主要定位在细胞膜上,分子质量为35.7 kD,介导由膜起始的雌激素信号通路。已证实ER-α36参与多种癌症的发生发展,其在乳腺癌中的作用已经研究得较为深入,但是ER-α36在胶质瘤发生中的作用至今不清。本研究发现在临床采集的胶质瘤样本中,肿瘤ER-α36的表达量明显高于瘤旁。下调胶质瘤细胞系中ER-α36的表达后,胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱。同时,荷瘤实验结果证明,敲低ER-α36后,胶质瘤细胞的成瘤能力显著降低。因此,我们推测,ER-α36和胶质瘤的发生和发展有密切关系,可能成为临床治疗胶质瘤的新靶标。背景胶质瘤是最为常见的脑部肿瘤,发病率存在明显的性别差异。ER-α36是一种新型的膜雌激素受体,其生物学作用正在引起越来越多的关注。因为胶质瘤的发病存在显著性别差异,所以我们推测激素受体可能在胶质瘤的发生及发展中发挥作用。有文献报道,ER-α36高表达显著升高乳腺癌患病风险,而且ER-α36介导的快速雌激素信号传导通路与乳腺癌干/祖细胞功能密切相关。另有文献报道,ER-α36被激活后能够刺激子宫内膜细胞的增生。有研究表明,ER-α36在胃癌、骨质疏松等疾病发生中也发挥重要作用,ER-α36的表达量增高能够削弱化疗药物对乳腺癌细胞的杀伤作用。ER-α36和多种肿瘤的发生和发展具有密切的关系,其有望成为肿瘤治疗的新靶点。虽然已经明确ER-α36参与了乳腺癌等若干种肿瘤的发生和发展,但是其在胶质瘤发生发展中的作用目前尚未见报道。目的建立ER-α36敲低的胶质瘤细胞株,用MTT实验、划痕实验和Transwell实验研究ER-α36敲低后对细胞的增殖、迁移、侵袭等造成的影响,并用荷瘤实验进行在体验证,明确ER-α36敲低后对胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等的影响。在此基础上,进一步研究介导上述作用的信号通路,初步探明胶质瘤中ER-α36发挥作用的分子机制。方法临床采集胶质瘤及瘤旁组织,利用Western blot检测ER-α36表达,观察分析ER-α36在肿瘤组织和瘤旁组织的表达情况。分别采用ER-α36激动剂G1和抑制剂IC162处理胶质瘤细胞株观察细胞增殖的改变,初步明确ER-α36在胶质瘤细胞增殖过程中的作用。将shER-α36质粒转入野生型胶质瘤细胞U87和U251中,构建ER-α36稳定敲低的细胞株,MTT实验检测细胞增殖能力的改变并通过裸鼠荷瘤实验进行在体验证,进一步明确敲低ER-α36对胶质瘤细胞增殖中的影响。通过划痕实验及Transwell等实验检测ER-α36敲低后,胶质瘤细胞迁移以及侵袭能力的改变,同时Western blot检测上皮以及间质细胞标志蛋白。随后,检测可能参与胶质瘤增殖、迁移、侵袭作用的信号通路,初步探明ER-α36参与胶质瘤增殖、迁移、侵袭等行为的可能机制。结果(1)Western blot检测结果表明,在12对胶质瘤样本中,其中10对样本的ER-α36在肿瘤组织中的表达量高于瘤旁组织。(2)MTT结果表明随着ER-α36特异性激动剂G1浓度增加,胶质瘤细胞的增殖能力增强,而ER-α36特异性抑制剂IC162可以显著降低胶质瘤细胞的增殖能力。(3)MTT检测结果证实,稳定敲低ER-α36的胶质瘤细胞,其增殖能力较对照细胞减弱。裸鼠荷瘤实验结果表明,胶质瘤细胞中ER-α36敲低后,其体内成瘤能力相较于对照组胶质瘤细胞明显降低。(4)划痕实验以及Transwell实验结果表明,ER-α36敲低能够降低胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力。Western blot检测上皮细胞以及间质细胞标志性蛋白,ER-α36敲低能够抑制胶质瘤细胞的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程。(5)Western blot 结果表明,ER-α36 敲低后 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 信号通路的激活减弱。结论ER-α36参与了胶质瘤的增殖、迁移、侵袭等过程,并与胶质瘤的EMT过程密切相关,这些作用可能是通过MAPK/ERK和PI3K/AKT信号通路来实现的。