维生素D缺乏对胎鼠生长发育和出生后神经行为发育的影响

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目的:探讨孕期母体维生素D缺乏对妊娠率、胎鼠宫内死亡和宫内生长发育的影响,以及仔代持续维生素D缺乏的神经行为发育损害效应。方法:8周龄ICR雌鼠被随机分为两组,即对照组和维生素D缺乏组(vitamin ddeficiency, VDD)。对照组饲养标准饲料(维生素D3﹥800IU/kg),VDD组饲养低维生素D饲料(维生素D3﹤25IU/kg)。小鼠自由饮食,室温维持在20℃~25℃,昼夜12h交替循环(VDD组过滤室内光照紫外波段),且保持相对湿度(50±5)%。适应性喂养2周后按雌雄比4:2于9:00PM合笼,第二日7:00AM开始检查雌鼠的阴栓,查到阴栓者视为交配成功,且定为妊娠第0天(GD0)。雌雄鼠连续合笼5天后记录各组交配成功数,以完成整个妊娠过程的定为成功妊娠,记录成功妊娠数。孕第18天时,对照组和VDD组孕鼠均随机调整为30只,并于每组随机挑选20只孕鼠处死,剖杀后统计活胎、吸收胎和死胎数,称量活胎鼠的体重,测量活胎鼠的身长,评价活胎鼠骨骼发育情况。各组余下10只孕鼠继续观察,分娩后各只孕鼠仔代均调整为8只,且保证每只孕鼠所喂养仔代雌雄比相同(孕鼠所生胎鼠小于8只的舍弃)。仔代断乳后,分为A、B和C三组,A组为对照组胎仔断乳后继续饲养标准饲料,即为正常饲料组;B组为VDD组胎仔断乳后继续饲养维生素D缺乏饲料,即为持续性维生素D缺乏饲料组;C组为VDD组胎仔断乳后饲养标准饲料,即为恢复正常饲料组。每周记录仔代小鼠断乳后体重,仔代成年后进行行为学相关试验(黑白巷试验、旷场试验、高架十字迷宫试验、六臂放射状水迷宫试验和糖水偏好试验)。结果:维生素D缺乏组母鼠血清25-(OH)D水平显著低于对照组。与对照组相比,VDD组妊娠率显著下降;VDD组平均每窝死胎数明显高于对照组,胎鼠均重和胎盘均重均显著低于对照组。骨骼检查结果显示,母鼠喂养维生素D缺乏饲料可导致胎鼠肋骨畸形和尾椎骨骨化不全。进一步观察发现:母体孕期和哺乳期维生素D缺乏未明显影响仔代早期的生理发育和行为发育。此外,断乳后持续性维生素D缺乏组雄鼠和雌鼠体重均低于正常饲料组体重;而恢复正常饲料组雄鼠和雌鼠体重均高于持续性维生素D缺乏组体重。旷场试验中,与正常饲料组相比,持续性维生素D缺乏组成年期雌鼠的跨格次数显著减少;糖水偏好试验发现,与正常饲料组相比,持续性维生素D缺乏组成年期雌鼠和雄鼠的糖水偏好系数均显著降低,而恢复正常饲料组成年期雌鼠和雄鼠糖水偏好系数较持续性维生素D缺乏组显著升高。结论:母体孕期维生素D缺乏导致妊娠率下降、胎鼠宫内死亡及宫内生长发育迟缓;仔鼠持续维生素D缺乏可增加焦虑相关行为,补充维生素D可改善其焦虑相关行为发育异常。
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