t-PA基因克隆、真核表达载体的构建及其在在体小血管吻合口中的表达

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaolch007
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随着显微外科技术和设备的不断完善和发展,断指再植及游离皮瓣移植的成功率显著提高。然而,小血管吻合口血栓栓塞仍然是其失败的主要原因。目前,临床多应用药物来防治,但效果并不确切,且缺乏吻合口组织特异性、用量大及副反应多等,因此,有必要寻找一种简单有效的防止吻合口血栓栓塞、提高通畅率的新方法。近年来,随着分子生物学的发展,基因治疗成为医学研究中的热点。借助适当的载体、将抗凝血因子的基因导入吻合口组织中以防止吻合口血栓栓塞,将是显微外科领域研究的重点。 正常细胞及肿瘤细胞均能产生具有溶栓活性的抗凝因子,其中组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator t-PA)最初是从鲍氏黑色素瘤细胞中分离获得的,并被证明有良好的抗栓性能,其作用机理是:t-PA与纤维蛋白结合后构象改变,以致极易与纤溶酶原形成三联复合物,将纤溶酶原活化为纤溶酶,随之使纤维蛋白降解。故在血凝块形成后,t-PA是有选择地在纤维蛋白表面活化纤溶酶原的,从而在局部溶解血栓。 在本研究工作中,我们首先克隆了组织型纤溶酶原激活物(tissue-type
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