【摘 要】
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背景:一般认为,成熟心肌细胞属于终末分化细胞,不具备再复制分化的能力.因此心肌细胞坏死后只能被纤维组织修复,产生心室重构、心功能衰竭.如果让梗死的心肌长出新的心肌细胞
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背景:一般认为,成熟心肌细胞属于终末分化细胞,不具备再复制分化的能力.因此心肌细胞坏死后只能被纤维组织修复,产生心室重构、心功能衰竭.如果让梗死的心肌长出新的心肌细胞,那么在心梗的治疗方面将产生革命性的进展.国内外研究证实胚胎干细胞和骨髓干细胞都能在体外诱导分化为有功能的心肌细胞,同时也有很多文章都相继报导了关于骨髓成体干细胞移植治疗心梗的动物实验,结果显示这些细胞能迁移至梗死灶,并参与形成有功能的心肌组织.但是外周血单个核细胞定向分化的体外实验研究未见相关报道.因此,我们假设体外直接培养外周血单个核细胞,经过5-氮杂胞苷诱导也能够向心肌细胞方向分化.目的:该研究从人外周血中分离出单个核细胞,直接体外培养并应用5-氮杂胞苷诱导其分化.旨在探讨外周血中的单个核细胞经过培养诱导后是否具有心肌细胞的特征,同时又具有干细胞的特征;试图说明诱导后的单个核细胞能够向心肌细胞方向分化.结论:在实验中我们观察到,培养所得贴壁细胞从在大体形态方面来看,大多呈纺锤形,部分成球状或者杆状外形,与文献报道骨髓干细胞向心肌细胞分化过程中的细胞形态类似.从免疫细胞化学染色结果来看,这些细胞表达肌球蛋白、α-肌节肌动蛋白、结蛋白和肌钙蛋白T这些构成心肌细胞骨架的主要蛋白.从RT-PCR结果来看,这些细胞也已经有心肌细胞α-MHC和β-MHC的基因表达.从流式细胞计数分析结果来看,经5-氮杂胞苷诱导分化后的单个核细胞CD34阳性或AC133阳性率为53.04±5.60﹪;肌动蛋白阳性率为42.70±11.73﹪.这些培养诱导后的单个核细胞具有心肌细胞的部分特征说明所培养的细胞在向心肌细胞方向分化;具备干细胞的特征说明,这些细胞还具有进一步分化的潜力.所以我们认为直接将诱导后的单个核细胞回输体内,经过归巢作用回流到心肌组织.在心肌组织微环境中,可以进一步分化为成熟的、有功能的心肌细胞.
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