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胃癌是一种死亡率很高的恶性肿瘤,大部分胃癌患者确诊时已处于晚期阶段,早期诊断十分重要。胃癌产生与演变过程极为复杂,涉及环境、遗传等各个方面,其中DNA甲基化在胃癌发生过程中发挥重要作用。PCDH8(protocadherin-8,原钙粘蛋白-8)是一种新的抑癌基因,是原钙粘蛋白家族的成员。研究发现,PCDH8基因的表达减少或缺失受其启动子甲基化的影响,与多种肿瘤关系密切。研究目的:1.检测PCDH8基因在人类胃癌组织及癌旁正常组织中的甲基化状态,分析PCDH8基因与胃癌TNM分期及是否存在淋巴转移之间的相关性。2.分析PCDH8与Dnmt1(细胞内甲基转移酶1)两者之间的相关性。3.探讨PCDH8与Dnmt1在胃癌发生及发展过程中发挥的生物学作用。研究方法:收集2012年7月-2013年9月在青岛大学医学院附属青岛市市立医院普外科行手术切除的60例胃癌患者的新鲜胃癌组织及其相应的癌旁组织标本,胃癌组织取自癌灶中央非坏死区域,癌旁组织取自距离癌组织5cm以上,且术前未行放疗、化疗、靶向治疗等抗肿瘤治疗。通过甲基化特异性聚合酶链式反应(methylationspecific PCR,MSP)的方法检测PCDH8基因启动子区甲基化情况,并分析在60例胃癌组织和其癌旁正常胃粘膜组织中的差异;采用免疫组化SP法检测胃癌组织以及相应的癌旁组织中PCDH8基因蛋白及Dnmt1蛋白的表达水平,综合分析PCDH8及Dnmt1表达与胃癌的关系,并对胃癌中PCDH8基因甲基化及Dnmt1蛋白表达的关系进行初步探讨。结果:PCDH8甲基化的阳性表达率在癌旁正常胃粘膜组织中仅为3.3%(2/60),而PCDH8甲基化的阳性表达率在胃癌组织中为55.0%(33/60),差异具有统计学意义(χ2=38.76,p<0.001);胃癌患者肿瘤组织中PCDH8的甲基化率与是否存在淋巴结转移的差异具有统计学的意义(χ2=17.47,p<0.001),而与肿瘤的TNM分期以及病人的年龄、性别等差异均没有统计学意义(p均>0.05)。PCDH8蛋白在胃癌组织的表达率(11.7%)远远低于其在癌旁正常胃粘膜组织中的表达率(90.0%)(χ2=73.65,p<0.001),而癌旁正常胃粘膜组织中Dnmt1蛋白的阳性表达率(5.0%)明显低于胃癌组织中Dnmt1蛋白的阳性表达率(73.3%)(χ2=58.79,p<0.001)。在胃癌组织中检测的PCDH8蛋白与Dnmt1蛋白的表达呈负相关(r=-0.544,p<0.001)。结论:PCDH8基因在胃癌组织中呈低表达,DNMT1在癌组织中高表达,表明其可能与胃癌发生关系密切。PCDH8基因甲基化以及Dnmt1表达的增高可能参与了胃癌的发生和发展过程。胃癌组织中DNMT1的蛋白的高表达,可能导致抑癌基因PCDH8基因启动子区发生异常甲基化,使抑癌基因蛋白表达减少,失去了对肿瘤发生的抑制作用。