密罗木(Myrothamnus flabellifolia,)是迄今为止发现的唯一木本复苏植物,前人从转录组水平对其耐旱机制进行了初步研究,发现大量转录因子受干旱脱水诱导。本文从密罗木中分离克隆了脱水早期诱导表达的转录因子基因MfWRKY41,并对模式植物拟南芥进行转化,对获得的转基因拟南芥纯系植物进行胁迫试验,以初步验证MfWRKY41基因的功能,主要获得以下研究结果:1、密罗木MfWRKY41基因的克隆及序列分析基于密罗木MfWRKY41 uniGene序列,克隆得到长度为950bp的MfWRKY41基因完整cDNA序列。其推导氨基酸序列中包含高度保守的核定位信号KKRK以及由63个氨基酸残基组成的典型的WRKY结构域。C端包含1个Cx7Cx23HxC型锌指结构,据此推断MfWRKY41基因属于WRKY家族Group Ⅲ类,并构建系统进化树进行了验证。2、MfWRKY41基因在拟南芥中的过量表达及表型差异将目的基因构建至真核表达载体,利用农杆菌介导将其转入模式植物拟南芥,最终获得T2代转基因纯系植株。各转基因植株间除Line A外,生长状况及表型无显著差异,Line A株系植株较WT和其余转基因株系植株更弱小,平均根长显著低于WT和其他基因型。3、转MfWRKY41基因拟南芥幼苗对胁迫的抗性对部分转基因拟南芥株系幼苗进行不同浓度的甘露醇和NaCl胁迫。结果表明在300mmol/L甘露醇的胁迫下,各转基因株系的幼苗没有表现出明显的抗性;在150 mmol/LNaCl胁迫下,株系Line K叶片及根系均能正常生长,无明显受胁迫表型,且其平均根长显著高于WT和其他株系;在250mmol/LNaCl胁迫下,各株系萌发后均不能正常生长。在不同NaCl浓度的胁迫下,Line A的萌发率及平均根长均显著低于WT和其他转基因株系,说明转基因Line A株系对盐胁迫较其他株系更敏感。初步分析是由于外源目的基因插入位点的差异造成各转基因株系间对胁迫的不同表型。4、转MfWRKY41基因拟南芥成株对NaCl胁迫的抗性对转基因成株进行300mmol/LNaCl高浓度盐胁迫处理,各株系中Line K表现出较好的抗性。WT在受胁迫后植株迅速萎蔫、变黄,复水后仍不能存活。而Line K受胁迫症状表现最轻,叶片有发紫现象且随着处理时间的延长颜色明显加深,复水7天后,存活植株均能正常生长,存活率显著高于WT。