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目前,蓝藻水华的暴发已经成为世界性的难题。真菌作为生物抑藻剂对蓝藻水华的治理具有重要意义,但是关于具有溶藻能力的真菌及其溶藻机制的报道相对较少。本文的目的是分离新型具有溶藻活性的真菌并且探讨其溶藻机制。从太湖水样中分离获得28个真菌菌株,固体平板上进行溶藻活性分析显示:共有4株具有针对微囊藻的溶藻活性。采用分子鉴定的方法,两株真菌鉴定为棘孢木霉Trichoderma asperellum SHS3和T.asperellum SHS4,但是两株真菌菌落形态不同;另两株分别为脐孢木霉Trichoderma brevicorpactum F3302和青霉 UnculturedPenicillium F20。将冻干的真菌菌丝接种到单细胞蓝藻惠氏微囊藻NJ-24(Microcystis wesenbergii)的藻液进行溶藻活性分析,结果显示:在真菌菌丝与藻液共培养的第5天,三株真菌棘孢木霉SHS3、棘孢木霉SHS4以及青霉F20均表现出显著的溶藻活性,溶藻率分别为96.9%、98.4%、98.1%。棘孢木霉SHS3对三种单细胞蓝藻惠氏微囊藻NJ-24、铜绿微囊藻PCC7820(Microcystis aeruginosa)和集胞藻PCC6803(Synechocystis sp.)的溶藻活性分析结果显示:在真菌菌丝与藻液共培养的第5天,棘孢木霉SHS3对三种单细胞蓝藻的溶藻率分别为96.9%,98.5%和88.2%,说明棘孢木霉SHS3对三种单细胞蓝藻的溶藻活性都十分显著。棘孢木霉SHS3与单细胞绿藻蛋白核小球藻FACHB-5(Chlorella pyrenoidosa)共培养5天后发现,棘孢木霉SHS3不能抑制蛋白核小球藻FACHB-5的生长,反而促进其生长,生长促进率达到了 28.8%.棘孢木霉SHS3能抑制群体水华微囊藻NJ-183(Microcystis flos-aquae)的生长,真菌菌丝与藻液共培养5天后,藻液中叶绿素a浓度降低了 45.3%。同时,棘孢木霉SHS3能够减小微囊藻群体的大小,实验组微囊藻群体表面积相比于对照组减小了 64.0%,并使微囊藻群体中的藻细胞排列疏松,以及使微囊藻的疏水性和自聚能力明显降低。进一步分析棘孢木霉SHS3胞外产物对惠氏微囊藻NJ-24的溶藻活性。培养过棘孢木霉SHS3的培养基滤液具有明显的溶藻活性,经过95℃加热后的棘孢木霉SHS3的培养基滤液没有溶藻活性。经过3.5kD孔径的透析袋透析去除小分子后的棘孢木霉SHS3的培养基滤液具有明显的溶藻活性,说明其中的大分子化合物具有溶藻活性。用硫酸铵沉淀法提取的棘孢木霉SHS3的胞外蛋白具有显著的溶藻活性。以上结果表明,棘孢木霉SHS3的溶藻物质为不耐热的大分子的胞外蛋白质。墨汁负染的显微照片观察发现,棘孢木霉SHS3处理后三种单细胞蓝藻惠氏微囊藻NJ-24、铜绿微囊藻PCC7820和集胞藻PCC6803的大部分细胞胶鞘消失。激光共聚焦显微照片分析结果显示:棘孢木霉SHS3处理后一些细胞的叶绿素被释放到细胞外。根据以上结果推测:棘孢木霉SHS3可能通过产生胞外酶降解微囊藻的多糖物质构成的胶鞘,进而破坏藻细胞。本文的研究发现棘孢木霉SHS3具有很强的溶藻活性,具有应用于控制蓝藻水华的潜力,首次发现真菌胞外蛋白的溶藻活性。