小鼠颈部异位子宫移植模型的建立及免疫排斥机制研究

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目的:迄今为止,全世界已报道52例人类子宫移植,其中分娩的有14例,成功率仅27%,子宫移植仍存在很多科学问题亟需系统研究。理想的动物模型是进行子宫移植基础研究的前提,然而,目前仍缺乏稳定可靠的子宫移植模型。现有的模型成功率低且不宜重复,因此,本课题旨在建立一个高效的模型,并基于该模型对子宫移植的免疫排斥问题进行初步研究。方法:使用C57BL/6小鼠建立同基因颈部异位子宫移植模型。移植物包括供体的右侧宫角、输卵管、卵巢以及宫颈和阴道上段。采用袖套血管吻合法将供体的右髂总动静脉与受体的右颈总动脉、颈外静脉分别进行吻合。术后通过宏观、组织学检查和胚胎移植实验评估模型的有效性。此外,建立Balb/c到C57BL/6小鼠的同种异体子宫移植模型,通过比较术后不同时间移植物的宏观和组织学改变来明确排斥时间和特征,通过流式细胞术、混合淋巴细胞反应、酶联免疫吸附实验和实时荧光定量PCR实验初步研究同种异体子宫移植的免疫排斥机制。结果:小鼠颈部异位子宫移植的手术成功率大于90%。基于同基因子宫移植模型发现移植子宫存活良好且具有功能。基于Balb/c到C57BL/6小鼠的颈部异位子宫移植模型发现,术后第6-7天,造口处的宫颈粘膜颜色红白相间、质韧,弹性差,宫体表面瘀血,损伤后无明显出血;组织学显示移植物出现多灶性甚至弥漫性组织坏死,伴有大量CD4+和CD8+T细胞浸润;IFN-y的基因表达显著增高。术后5-6天受者对供者特异性抗原的免疫应答能力最强,术后5-7天脾脏、外周血中CD4+和CD8+T细胞的比例显著增多,术后6-7天血清中IFN-y分泌水平最高。结论:小鼠颈部异位子宫移植模型是研究子宫移植相关科学问题的一个有效、简便的模型。我们初步认为Balb/c到C57BL/6小鼠的同种异体颈部异位子宫移植模型的免疫排斥反应是以Th1介导的急性细胞免疫排斥反应为主,排斥时间点为术后第6-7天,并且造口处宫颈粘膜的宏观改变可以作为术后免疫排斥监测的一个简便的指标。
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