转IL-2基因双歧杆菌联合化疗药对小鼠移植瘤H22的治疗作用

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如何治疗肿瘤是人类面对的一个重大课题,尽管不断产生新的药物和方法治疗肿瘤,迄今为止,尚无一种药物或方法能够在低毒副作用的条件下高效的抑制各种肿瘤细胞。随着对肿瘤研究的日益加深,人们意识到就目前情况而言,将现有的药物或治疗方法相结合使用,通过不同的途径发挥抗肿瘤的作用是一条比较可行的思路。我们做了以下两个方面的研究:   1.在控制肿瘤的发生发展中,免疫系统扮演着重要角色。IL-2作为一种细胞因子,被认为是一种调控T细胞反应核心细胞因子,证实对多种肿瘤有着良好的治疗作用,但是高剂量IL-2的系统注射伴随着对生物体毒性,研究者探索一些新的用药方法来保证其治疗效果的同时降低其毒性。我们将IL-2基因连接到大肠杆菌-双歧杆菌的穿梭质粒pBV22210中,再经过电转导将其转入长双歧杆菌中,命名为B.longum-IL2,并通过动物实验来检验其抑瘤率与对动物生存时间的影响。与此同时,我们将其与实验室前期构建的B.longum-endo(携带内皮抑素表达载体的双歧杆菌)、B.longum-TKAIL(携带TRAIL表达载体的双歧杆菌)以及环磷酰胺分别联用,观察其对荷瘤小鼠抑瘤率及生存率的影响。结果发现:B.longum-IL2组的抑瘤率是56.2%,远超于普通双歧杆菌的32%。而其与B.longum-endo、B.longum-TRAIL、环磷酰胺的联用进一步提升了抑瘤效果,抑瘤率分别达到了74%,82%,与77%。在生存期方面,除了单纯注射CTX的用药组,其他各组与生理盐水组相比较均有明显的生命延长效果;相较于普通长双歧杆菌组,B.longum-IL2与B.longum-endo、B.longum-TRAIL联用均显示具有统计学意义的生命延长效果。与单纯使用OTX组相比,B.longum-IL2与CTX联合应用也有效地延长了生存时间。两种转不同基因双歧杆菌联用组相比于B.longum-IL2单用组,虽然延长了生存时间,但是却缺乏统计学意义。   2.硒(Se)是一种人体必须的微量元素,能够还原体内自由基,有助于肿瘤预防和治疗。实验室前期构建了B.longum-endo,对小鼠肿瘤模型通过口服用药也取得了良好的疗效。本次试验中,我们将二者联合起来,将B.longum-endo在富硒培养基中生长,命名为Se-B.Longum-endo。在体外试验中,Se-B.Longum-endo保持了与普通长双歧杆菌相似的对有害微生物的拮抗活性。在小鼠肠道的分布实验中,我们发现其主要定植于小鼠的盲肠部分。在抑瘤率试验中,口服Se-B.Longum-endo组抑瘤率为60.1%,高于B.Longum-endo的51.8%,研究表明B.longum-endo与Se的结合并未影响其正常的肠道分布和保护肠道的作用,富Se后的B.longum-endo具有更强的抗肿瘤作用。
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