论文部分内容阅读
研究背景与目的:非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma,NHL)是一组来自血液系统的恶性肿瘤。世界卫生组织根据病理和组织学特征将NHL分为40多种,其中B细胞来源的占85%左右(B-cell Non-Hodgkin lymphoma,B-NHL)。有调查显示,B-NHL的发生可能与病毒或细菌感染、免疫环境改变以及基因突变等因素密切相关。淋巴瘤的传统治疗方法有放化疗、骨髓移植等。随着CD20单抗、个体化治疗及靶向细胞治疗等治疗手段的出现,B-NHL的预后及生存得到进一步改善,然而侵袭性淋巴瘤中仍然存在复发难治的问题。细胞衰老(Cell senescence)是指一种较为稳定的细胞周期停滞,由包括端粒变短、癌基因激活、DNA损伤在内的多种因素触发。细胞衰老是一个复杂的、多因素参与的过程,可能具有广泛的效应机制。在分子水平上,衰老会触发基因表达模式产生重要的变化。另一方面,衰老的细胞能够分泌多种因子及蛋白酶,称为衰老相关分泌表型(Senescence-Associated Secretory Phenotype,SASP),同时SASP能够与免疫细胞在肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)中发挥作用,促进肿瘤免疫逃逸,导致患者复发难治。淋巴瘤的发生发展与TME之间有着紧密的关系,TME一方面包括肿瘤所在组织的结构、功能和代谢,另一方面与肿瘤细胞自身的内在环境密切相关。肿瘤细胞可以通过自分泌和旁分泌,改变和维持所处环境,促进自身发展。而全身和局部组织亦可以通过代谢、分泌以及改变结构和功能来限制和影响肿瘤发展。因此,从细胞衰老的角度研究其对B-NHL中TME的影响,对B-NHL的治疗及预后具有很大的临床价值。方法:收集B-NHL患者的外周血及淋巴结组织标本,检测B-NHL患者外周血单个核细胞中衰老细胞的表达情况;检测外周血中CD4+T细胞、NK细胞、调节T细胞(Regulatory T Cells,Tergs)、髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的表达水平;检测外周血血清中SASP中相关细胞因子的表达水平;观察淋巴瘤细胞的形态;检测患者淋巴瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)的表达水平。所获得的实验数据均使用SPSS19.0和Graph Prism6进行分析、作图。结果:B-NHL患者外周血单个核细胞中存在衰老细胞,且初诊组与未缓解组高于缓解组。在CD4+T细胞的检测中,缓解组的表达水平高于初诊组及未缓解组;在NK细胞的检测中,缓解组的表达水平高于未缓解组;在Tregs的检测中,未缓解组的表达水平较缓解组升高。在M-MDSCs中,初诊组的表达水平高于缓解组;在G-MDSCs中,缓解组及未缓解组的表达水平均高于初诊组。在细胞因子的检测中,白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)等细胞因子初诊组的表达水平均高于缓解组;在IL-8中,未缓解组表达水平高于初诊组;在IL-6、白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)等细胞因子中,未缓解组的表达水平也高于缓解组;在白介素-35(IL-35)中,缓解组的表达水平与初诊组和未缓解组相比呈下降趋势。在TAMs的检测中,淋巴瘤组织中CDl63的阳性产物定位于巨噬细胞的细胞膜上,呈黄褐色或棕褐色染色,而在淋巴结反应性增生组织中少见染色细胞,低表达CD163。结论:B-NHL患者外周血单个核细胞中存在细胞衰老现象。淋巴瘤细胞、免疫细胞以及SASP分泌的细胞因子、抑制因子等共同参与构成复杂的TME。在淋巴瘤发展的初期,SASP对TME的影响可以促进机体有效杀伤淋巴瘤细胞,随着疾病的进展,TME对SASP产生反向作用,促进淋巴瘤细胞逃避免疫系统的监测及放化疗,如果此时治疗结束,衰老的肿瘤细胞又可重新复活进行复制,最终导致淋巴瘤患者复发难治。