冰片鸦胆子油纳米乳的制备及其对大鼠脑胶质瘤抑瘤作用的研究

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目的制备冰片鸦胆子油纳米乳,考察其理化性质、进行稳定性试验、构建C6大鼠脑胶质瘤模型,并大鼠脑胶质瘤抑瘤作用进行研究,以期以纳米乳为载体,并配伍冰片,来提高鸦胆子油对脑胶质瘤的抑制作用。方法通过柱前衍生化处理,建立GC测定鸦胆子油中油酸含量的分析方法。采用转向法制备冰片鸦胆子油纳米乳,通过滴定法绘制伪三元相图,筛选合适的乳化剂和助乳化剂。考察乳化剂、助乳化剂、油相、Km值等对纳米乳区域的影响,以相行为和纳米乳区域的面积为指标,获得最佳处方。通过透射电子显微镜观察冰片鸦胆子油纳米乳外观形态、激光粒度测定仪测定其粒径分布、Zeta电位,用高效气相色谱检测冰片鸦胆子油纳米乳中油酸的含量,考察冰片鸦胆子油纳米乳的稳定性,并通过构建大鼠C6脑胶质瘤模型,考察模型组、鸦胆子油注射剂组、鸦胆子油纳米乳组和冰片鸦胆子油纳米组对大鼠体内胶肿瘤的抑制作用、瘤重和肿瘤体积变化的影响。结果建立了GC测定鸦胆子油中油酸含量的分析方法,在0.15-0.75mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)。经过绘制伪三相图优化处方,最终确定的冰片鸦胆子油纳米乳最佳处方为:油相IPM35%,鸦胆子油(含1%冰片)35%,乳化齐(?)Cremopher RH4018%, Labrasol12%.所得到的纳米乳外观呈圆整球形,平均粒径(47.60±0.57)nm,PDI为(0.22±0.01),Zeta电位为(-1.06±0.12)mV,纳米乳中油酸含量(0.4241±0.0056) mg/mL,并且纳米乳的稳定性较好。本实验成功构建大鼠C6脑胶质瘤模型,体内抑瘤实验研究结果显示,模型组、鸦胆子油注射剂组、鸦胆子油纳米乳组和冰片鸦胆子油纳米组的瘤重分别为(1.32±0.19)g,(0.84±0.08)g,(0.76±0.06)g,(0.57±0.10)g,鸦胆子油注射剂组、鸦胆子油纳米乳组和冰片鸦胆子油纳米组的肿瘤质量抑制率分别为36.49%,42.80%,56.94%;模型组、鸦胆子油注射剂组、鸦胆子油纳米乳组和冰片鸦胆子油纳米组的肿瘤体积分别为(72.2±9.4)mm3,(44.2±5.1)mm3,(42.3±4.9)mm3,(27.9±2.5) mm3,鸦胆子油注射剂组、鸦胆子油纳米乳组和冰片鸦胆子油纳米组的肿瘤质量抑制率分别为38.8%,41.4%,61.3%。鸦胆子油能有效抑制胶质瘤细胞的生长,并且冰片鸦胆子油纳米组对大鼠胶质瘤的抑制作用增强。结论采用转向法制备冰片鸦胆子油纳米乳表面圆整光滑,粒径分布均匀,纳米乳中油酸含量较高,稳定性较好。体内抑瘤作用实验表明,冰片鸦胆子油纳米乳对大鼠胶质瘤具有较强的抑制性,提高了鸦胆子油对治疗脑胶质瘤的疗效,从而有利于开发鸦胆子油作为治疗脑胶质瘤药物的市场前景。本实验结果为抗肿瘤药物靶向制剂的设计、为开发与评价提供重要的理论意义和实践参考价值。
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