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背景:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心脑血管疾病共同的病理生理基础。新发现的生物活性肽Salusin-α具有抗动脉粥样硬化作用,主要通过抑制酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(Acyl-co A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的表达抑制泡沫细胞形成。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ)是一类由配体活化的核转录因子,PPARγ激活后影响AS的多个病理过程发挥抗动脉粥样硬化作用。目的:观察Salusin-α干预THP-1源性泡沫细胞形成过程中PPARγ、ACAT1的表达变化,初步探讨Salusin-α是否通过PPARγ通路下调ACAT1的表达抑制THP-1源性泡沫细胞形成。方法:(1)THP-1细胞用160 n M佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)孵育48 h诱导分化为巨噬细胞,将THP-1源性巨噬细胞随机分为对照组和不同浓度Salusin-α干预组。对照组用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)孵育48 h诱导分化为泡沫细胞,不同浓度Salusin-α干预组与对照组相比在ox-LDL孵育的同时加入不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 n M)Salusin-α。酶偶联比色法用于检测细胞内游离胆固醇(free cholesterol,FC)和总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,两者之差即为胆固醇酯(cholesterol ester,CE),比较各组CE/TC的比值。油红O染色用于观察细胞内脂滴的变化。RT-PCR和Western blot分别用于检测各组ACAT1、PPARγm RNA和蛋白的相对表达量。(2)THP-1细胞用160 n M PMA孵育48 h诱导分化为巨噬细胞,将THP-1源性巨噬细胞随机分为对照组、Salusin-α组、Salusin-α+T0070907组、T0070907组,T0070907为特异性PPARγ抑制剂。对照组用50 mg/Lox-LDL孵育48 h诱导分化为泡沫细胞,Salusin-α组在ox-LDL孵育的同时加入0.6 n M Salusin-α,Salusin-α+T0070907组在ox-LDL和Salusin-α孵育前用10μM T0070907预处理2 h,T0070907组在ox-LDL孵育前用10μM T0070907预处理2 h。各组的观察指标同第一部分。结果:1.对照组CE/TC为67.13±1.88%,油红O染色可见细胞内较多脂滴,提示泡沫细胞模型构建成功。2.胆固醇测定结果示,不同浓度Salusin-α干预组CE/TC分别为59.15±2.71%、52.99±2.51%、45.38±2.99%、52.18±2.95%、55.99±2.10%,可见随着Salusin-α浓度的增加CE/TC先降低后稍增加,0.6 n M时最低(P均<0.05);对照组、Salusin-α组、Salusin-α+T0070907组、T0070907组CE/TC分别为67.13±1.88%、45.38±2.99%、59.07±2.54%、68.23±1.60%,可见T0070907可部分逆转Salusin-α引起的CE/TC降低(P均<0.05)。3.油红O染色结果示,Salusin-α可抑制THP-1源性泡沫细胞形成,而T0070907则削弱Salusin-α抑制THP-1源性泡沫细胞形成的作用。4.RT-PCR结果示,随着Salusin-α浓度的增加,ACAT1 m RNA相对表达量降低,而PPARγm RNA相对表达量增高;T0070907则削弱Salusin-α对ACAT1、PPARγm RNA相对表达量的影响。5.Western blot结果示,随着Salusin-α浓度的增加,ACAT1蛋白相对表达量降低,而PPARγ蛋白相对表达量增高;T0070907则削弱Salusin-α对ACAT1、PPARγ蛋白相对表达量的影响。结论:Salusin-α通过激活PPARγ通路下调ACAT1的表达,抑制THP-1源性泡沫细胞形成,发挥抗动脉粥样硬化作用。