MyoD、myogenin在低氧、运动引起肌球蛋白重链转变中的调节作用

来源 :北京体育大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:huangma2009
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本研究目的在于探索肌球蛋白重链(MHC)转换的转录调控机制,研究肌源性调节因子MyoD和myogenin是否参与MHC转换的基因调控,为此,设定低氧和耐力训练的双重刺激,观察MHC表达不同改变条件下MyoD和myogenin的表达。从而从机制上探讨MHC改变的原因,为不同运动员选材和合理的营养干预提供理论基础。方法:实验动物为SD大鼠40只,随机分为常氧对照组(NC)、常氧训练组(NT)、低氧对照组(HC)和低氧训练组(HT)。HC组和HT组动物均生活在模拟海拔4000米高度的低氧舱中(氧浓度12.7%),每天至少保证22小时低氧时间;NT和HT训练组进行跑台练习(均在常氧条件下进行):跑台坡度+10°,跑速20米/分,每天1次,每次1小时,每周训练6天,所有处理共计28天,28天后取浅层胫前肌和股中间肌,NC组加取两侧比目鱼肌。RT-PCR方法测定MyoD、myogenin及四种MHC亚型mRNA表达,SDS-PAGE方法测定各种MHC亚型蛋白表达,生化方法测定肌球蛋白Ca2+-ATPase活性。结果:常氧耐力训练不影响MHC蛋白组成;MHC mRNA表达表现为MHC-Ⅱx mRNA显著下降,MHC-Ⅱa mRNA不显著性升高;MyoD和myogenin mRNA均显著下降;肌球蛋白Ca2+-ATPase活性无明显改变。单独低氧刺激使MHC-Ⅱa蛋白表达显著下降, MHC-Ⅱx和MHC-Ⅱb蛋白表达显著升高;低氧影响MHC基因表达为MHC-Ⅱa mRNA显著升高,MHC-ⅠmRNA不显著下降;Myogenin mRNA无显著改变,MyoD mRNA有下降趋势,但不具显著性;肌球蛋白Ca2+-ATPase活性显著增加。低氧运动组MHC蛋白组成的改变与低氧组一致,即MHC-Ⅱa显著下降, MHC-Ⅱx和MHC-Ⅱb显著升高;MHC mRNA表达为MHC-Ⅱb mRNA显著升高;Myogenin mRNA显著升高,MyoD mRNA无明显改变。Myogenin与MHC-Ⅰ基因表达显著正相关(偏相关系数r =0.6874, P=0),MHC-Ⅱb与myogenin mRNA也显著正相关(偏相关系数r =0.4662, P = 0.029)。安静状态下,比目鱼肌Myogenin mRNA表达显著高于浅层胫前肌,MyoD mRNA显著低于浅层胫前肌,Myogenin/MyoD比值比目鱼肌显著高于浅层胫前肌。结论:1、耐力训练和低氧对于MHC改变是两种不同形式的刺激,耐力训练使慢型MHC表达升高,低氧使快型MHC表达升高。2、Myogenin与MHC-Ⅰ基因表达显著正相关说明myogenin可能在转录水平调节MHC-Ⅰ表达。3、MHC-Ⅱb与myogenin mRNA存在正相关,根据以往研究显示的MyoD在MHC-Ⅱb和MHC-Ⅱx区域选择表达的理论,MHC的转录调节可能更为复杂。4、肌球蛋白Ca2+-ATPase活性的改变始终与MHC组成的改变保持一致,即当MHC-Ⅱ增加时肌球蛋白Ca2+-ATPase活性增加;前者不变时,后者也保持不变。说明MHC组成决定了肌球蛋白Ca2+-ATPase活性。5、慢肌Myogenin基因表达高于快肌,快肌MyoD基因表达高于慢肌。创新点:1、以往对于MyoD和Myogenin的研究主要集中于胚胎肌发生的过程,本研究首次利用运动模型探讨两因子的改变。2、首次进行运动模式下MHC的改变与MyoD和Myogenin关系的研究。3、首次探讨在多种MHC改变条件下(低氧、运动、低氧运动),MHC与MyoD和Myogenin关系。4、用电泳方法确定的MHC组成作为肌纤维分类的依据。
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