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癌症的传统治疗手段为手术疗法、化学疗法和放射疗法治疗，均具有一定的局限性，基因治疗法为癌症的治疗提供了一个新途径。常用的基因治疗病毒载体为腺病毒,腺病毒（Adenoviruses,Ad）是无囊膜DNA病毒，双链DNA基因组大小为36kb，腺病毒可引起上呼吸道等疾病。自二十世纪八十年代起，腺病毒作为载体已广泛的应用在基因的转导实验中。在人体器官中，腺病毒载体能够实现510%的转导效率。溶瘤腺病毒不仅能够溶解杀伤肿瘤细胞，同时可以在肿瘤细胞进行自我复制，其子代腺病毒能够在肿瘤细胞中传播。许多临床前和临床I期研究表明，重组腺病毒需要进一步提高其安全性和抗肿瘤效果。重组腺病毒Ad-VT具有肿瘤特异性杀伤和特异性复制能力，Ad-VT采用RAPAd.I腺病毒载体系统，基于hTERTp肿瘤启动子，携带Apoptin基因构建而成。本研究按照国家食品药品监督管理局（SFDA）对新药研究的要求，对静脉注射重组腺病毒治疗癌症进行临床前评价，依照《药物非临床研究质量管理规范》（GLP）和《人基因治疗研究与制剂质量控制指导原则》，建立纯化工艺和质量标准，通过小鼠、Wistar大鼠、Beagle犬等实验动物进行安全性评价，探讨重组腺病毒副作用和安全性。本实验中，采用阴离子Scource30Q层析介质和分子筛Sepharose4FF层析介质，对重组腺病毒进行两步法纯化试验；按照《中国生物制品规程》和《中国药典》第三部等，对纯化后的重组腺病毒进行检测，从治疗基因的存在，病毒数量、纯度和生物活性、腺病毒污染、残余杂质等四个层面进行检测，建立质量标准；对符合质量标准的重组腺病毒进行安全性评价。层析纯化结果表明，建立的两步纯化层析技术，纯化后的回收率达66.9%。质量控制检测结果表明治疗基因未丢失，病毒颗粒数为9.36×1011vp/mL，纯度为A260/A280=1.227，比活性为4.807%，符合要求。无野生型病毒污染，残余宿主DNA含量为1ng/mL，残余牛血清（BSA）含量为46.2082ng/mL。急性毒性试验结果表明重组腺病毒无急性毒性作用，小鼠LD50>5×1010vp/kg。长期毒性试验结果表明无反应剂量为Wistar大鼠1.25×1010vp/kg和Beagle犬2.5×109vp/kg，分别为拟用临床剂量的75倍和15倍。一般药理学结果表明对小鼠自主活动、中枢神经系统、消化系统、呼吸系统和心血管系统各指标上，实验组动物未显示出差异。以上结果表明，按照《人基因治疗研究与制剂质量控制指导原则》对重组腺病毒进行临床前相关研究，建立的纯化工艺能够保证重组腺病毒质量符合临床前和临床，在拟用药物剂量下安全可靠，无毒副作用。