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研究目的:532nm激光是国产新型光敏剂血啉甲醚(HMME)光动力疗法(PDT)治疗良性血管性疾病的首选光源。了解该波长激光对视网膜的作用特点是HMME-PDT用于脉络膜新生血管(CNV)治疗的前提。本研究拟探索PDT照射方式下,532nm激光对兔视网膜的剂量效应关系;数学模拟光照后视网膜的温度场分布,理论分析视网膜损伤机制,为532nm激光安全用于眼科PDT治疗提供实验和理论依据。 方法与结果:1.532nm激光对兔视网膜生物效应的实验研究:选择新西兰白兔25只和青紫蓝灰兔4只,通过裂隙灯将532nm激光(或578.2nm激光)导入兔眼底,激光功率密度为500~2000mW/cm~2,光斑直径约2mm,照光时间100s、200s和300s,分别于照后1h、24h、3d、7d、14d和28d,进行眼底镜、荧光血管造影(FA)、光镜和电镜观察。结果显示:(1) 当功率密度高于1600mW/cm~2,照射时间200~300s时,照后24h眼底镜下可见白兔视网膜灰白色凝固斑,大于照光面积,常伴有大片出血,FA示高荧光渗漏,荧光遮蔽,光镜下视网膜全层结构破坏,视网膜下可见大量血细胞或渗出,脉络膜血栓形成;当功率密度为1200~1600mW/cm~2,照光时间为100~200s,或功率密度为1000mW/cm~2,照光时间300s,照后24h白兔视网膜表现为与照光面积相近的灰白色改变,有时出现小片状或点状出血,FA示荧光渗漏,部分荧光遮蔽,视网膜内外核层细胞减少、固缩,内外节肿胀、崩解,视网膜下出现少量红细胞或渗出;当功率密度为1000~1200mW/cm~2,照光时间为100~200s,部分白兔视网膜可见淡灰色改变,小于照光面积,无出血,FA示低荧光渗漏,外核层细胞减少,光感受器肿胀。(2)能量密度相同的情况下,激光功率密度是影响视网膜损伤程度的重要因素。如同为200J/cm~2,功率密度2000mW/cm~2,照射时间100s组比功率密度1000mW/cm~2,照射时间200s组损伤明显严重(P<0.05) (3) 当t=100s时,532nm激光灰兔视网膜的损伤阈值ED50为76.47J/cm~2,白兔视网膜ED50为119.58J/cm~2,两者之比约为1:1.56。(4) 当t=100s时,光镜下白兔视网膜最小可见损伤剂量为80J/cm~2;电镜下可见60J/cm~2组部分外节膜盘排列紊乱,扭曲,但28d后恢复正常。(5)578.2nm对白兔视网膜的损伤较532nm激光为重,出现改变的时间要早于532nm激光,且以脉络膜损伤为主。(6) 532nm激光照后24h,视网膜损伤最重;之后