IL-10基因多态性与HPV感染易感性及宫颈癌的研究

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目的:探讨唐山地区汉族妇女宫颈癌发生的危险因素、发病特点及发病机制,从而探讨白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)基因多态性、人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染、宫颈癌三者之间的关系,为宫颈癌的预防及HPV疫苗在唐山的应用推广提供依据。方法:采用回顾性流行病学问卷调查的形式,对218例汉族住院患者,其中103例宫颈癌患者,115例宫颈正常的患者进行临床流行病学调查。调查内容包括一般资料、既往史、性行为史,月经及生育史、口服避孕药史、吸烟史、婚姻状况及受教育程度等。在对照组及病例组中的上述各影响因素均无显著性差异,使两组具有可比性。抽取静脉血3ml,并留取大小约0.5cm×0.2cm×0.2cm宫颈组织。利用DNA提取试剂盒提取血清中基因组DNA,酚仿抽提法提取宫颈组织中HPV-DNA。分别采用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应(ARMS-PCR)技术及聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RELP)检测上述218例患者血清中IL-10 -1082G/A及-592A/C的存在,并确定其基因型。采用PCR技术检测上述218例患者宫颈组织中HPV16/18的感染情况。对IL-10-1082G/A、-592A/C及HPV16/18的PCR扩增产物进行测序。运用直接计数法对IL-10基因多态性位点进行单倍型构建与分析。运用SPSS13.0软件进行统计分析。结果:IL-10基因多态性、宫颈癌及HPV感染易感性三者之间关系方面结果如下:1 IL-10-1082G/A位点基因多态性与宫颈癌的关系在宫颈癌易感性与IL-10-1082G/A位点基因型频率及等位基因频率的分析中显示:IL-10-1082G/A位点基因型及等位基因分布频率在CC组和对照组差异均无显著性(P>0.05)。2 IL-10-592A/C位点基因多态性与宫颈癌的关系在宫颈癌易感性与IL-10-592A/C位点基因型频率及等位基因频率的分析中显示:IL-10-592A/C位点基因型频率在CC组和对照组中的分布无统计学意义(P>0.05),等位基因A频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。3 IL-10-1082G/A位点、IL-10-592A/C位点连锁不平衡分析分析发现单体型(GC、GA、AA)在CC组中频率分布分别为6.8%、18.0%、75.2%,对照组分别为8.7%、27.0%、64.3%,差异有显著性(P<0.05)。4 HPV16、18感染与宫颈癌的关系研究显示:HPV16、18和16+18感染率在病例和对照组中比较差异均显著(P<0.05)。不同病理类型HPV16、18和16+18感染率依次为宫颈鳞癌69.2%、1.2%和11.9%,腺癌6.7%、0和46.7%,腺鳞癌仅有HPV16+18混合感染一例。不同年龄段HPV16/18总感染率两两比较均无差异性( P>0.05 );吸烟对HPV16、HPV18、HPV16+18感染影响不显著(P>0.05)。5 IL-10基因启动子区-592A/C基因多态性在HPV16、18检测阳性组和阴性组中分布,经统计学分析差异均显著,CA及AA基因型增加了HPV18感染的易感性(PCA=0.043,PAA=0.035)。6 IL-10基因启动子区-1082G/A基因多态性在HPV16、18检测阳性组和阴性组中分布,经统计学分析,A等位基因分布差异稍显著,增加了HPV16感染的易感性(P=0.049)。结论:1 IL-10基因多态性与CC易感性相关,IL-10-592A/C位点等位基因A可能是宫颈癌发生的遗传易感基因,对CC的发生、发展、治疗有重要意义。2唐山地区HPV16和HPV16+18混合感染与宫颈癌密切相关,HPV16是导致鳞癌的主要亚型,HPV16、18混合感染主要导致腺癌,年龄和吸烟与HPV16、18及HPV16+18混合感染无关。3在唐山地区汉族妇女IL-10基因启动子区-592A/C基因多态性可能与HPV16、18感染导致宫颈癌具有相关性。-1082G/A位点的A等位基因与HPV16感染导致的宫颈癌有关。
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