Cancer/testis lnc RNA是一类新定义的在正常睾丸和癌细胞中特异性高表达的长链非编码RNA。THOR是高度保守的睾丸特异性长链非编码RNA,代表了一类具有重要功能的Cancer/testis lnc RNA,其结构和功能都经历了正向进化的选择。已有研究揭示THOR参与生殖系统发育的调节,但是具体的机制尚未清晰,而且THOR在雄性动物的生殖系统发育中的作用及机制研究很少。本研究通过CRISPR/Cas9技术建立稳定遗传的THOR-KO基因编辑小鼠模型,研究THOR对雄性小鼠生育的影响。对THOR-KO小鼠的生存情况和雄性小鼠的生育能力进行检测和统计,包括血清雄性激素水平、体外受精能力、个体交配成功率、后代雌雄比例和生存曲线等。结果显示,THOR-KO小鼠的存活率降低,THOR-KO雄性小鼠生育能力降低,睾丸较小,精子活力减弱,睾丸生精细胞凋亡增加,后代雌雄比例失衡。进一步为了研究THOR通过何种途径参与雄性生殖系统发育,RT-q PCR检测THOR下游靶基因的m RNA表达水平。与WT小鼠相比,IGF2BP1、c-MYC、IGF1、IGF2的m RNA表达降低。Western Blot对IGF2下游MEK-ERK通路进行蛋白水平的验证,进一步发现,MEK-ERK信号通路表达降低。综上所述,THOR敲除后,调节靶基因IGF2的下游MEK-ERK信号通路,影响睾丸发育和精子发生。结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是常见的消化道恶性肿瘤之一,其患病率和死亡率逐年上升。关于THOR在CRC中的作用的探索目前仅在细胞水平进行。为了明确THOR在CRC发生和发展中的贡献,将APCMin/+小鼠与THOR-KO交配繁殖,获得THOR基因敲除的APCMin/+小鼠,并利用CRISPR/Cas9技术构建THOR敲除的人结直肠癌SW480细胞。结果表明,THOR基因敲除APCMin/+小鼠的存活率比APCMin/+小鼠高50%,个体比APCMin/+小鼠大。THOR基因敲除APCMin/+小鼠肠道炎性损伤得到缓解,结直肠腺瘤的发生降低。CCK-8结果发现,THOR基因敲除SW480的细胞增殖率降低大约50%。Transwell实验表明,THOR基因敲除SW480细胞的迁移能力降低。此外,为阐明THOR在CRC发生发展中的调控机制,通过RT-q PCR检测THOR下游靶基因的m RNA表达水平。结果表明,c-MYC、APC、SOX9、Wnt1、CDH1、Axin1、Axin2、LEF 1等的m RNA水平显着降低。Western Blot结果进一步证实Wnt/β-catenin信号通路的表达降低。综上所述,THOR基因敲除下调Wnt/β-catenin信号通路,调控下游转录因子TCF1和LEF1,影响c-MYC和Cyclin D1的表达,降低癌细胞的生长、增殖和迁移,从而参与CRC的发生发展。本研究成功构建了两种THOR基因不同片段长度敲除的小鼠,并通过交配繁殖获得THOR敲除的APCMin/+小鼠,在哺乳动物水平探索THOR在雄性生殖系统发育和结直肠癌发生发展中的作用和调控机制。