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目的(1)观察外源性毒素MPP+作用对SIAH活性和α-synuclein泛素化、降解通路的影响。(2)探讨干扰SIAH活性对细胞生存率和α-synuclein泛素化、降解通路的影响。方法取PC12细胞,分别用0.25mM、0.5mM、1.0mM MPP+及1：100（2ug/ml）、1：50（4ug/ml）、1：25（8ug/ml）SIAH-1抗体处理细胞24h，采用MTT法检测细胞活力，据细胞存活能力选取SIAH-1抗体及MPP+作用于细胞的浓度，再按实验要求把实验分为空白对照组、SIAH-1抗体（1：50）组、MPP+(0.5mM)组、MPP++SIAH-1抗体组，上述方法处理细胞24小时后，通过MTT法检测细胞活力，Western Blot检测α-synuclein、LC3-II、SIAH、E1在蛋白水平表达的变化，荧光定量PCR检测α-synuclein、LC3、SIAH、E1基因在mRNA水平表达的变化。结果(1)0.25mM MPP+组与对照组细胞活力无明显差别(P=0.5570)，差异无统计学意义，0.5mM和1.0mM浓度MPP+细胞活力均较对照组明显下降，尤以1.0mM MPP+组最显著；三种不同浓度SIAH-1抗体处理细胞后活性均增加（P均<0.01），且三组SIAH-1抗体浓度组之间细胞活力无明显差异(P均>0.05)；但在MPP+组各浓度SIAH-1抗体处理细胞后细胞活力均明显升高（P均<0.05），以1：25和1：50浓度的SIAH-1抗体效果最为明显(t值分别为5.988，3.766；P值分别为0.001，0.0093)，且此二组间细胞活力无明显差异（P>0.05）。(2) Western Blot结果显示：PC12细胞加入SIAH-1抗体后LC3-II、α-synuclein、SIAH（t值分别为3.257，2.387，8.368，P值分别为0.0173，0.0360，＜0.0001）蛋白水平均下降，E1表达升高（t=5.096，P=0.0049）；MPP+处理细胞后，LC3-II蛋白水平明显增加（P＜0.01），E1(t=4.195, P=0.0247)表达也升高，而再加入SIAH-1抗体后明显降低了由MPP+引起的LC3-II表达的增高（P＜0.0001）、同时明显升高了E1水平（P＜0.01）；另外MPP+处理导致α-synuclein、SIAH表达的升高（P均＜0.01），加入SIAH-1抗体后明显降低了SIAH及α-synuclein的水平（P均＜0.0001）。(3)荧光定量PCR结果显示：α-synuclein、SIAH、 E1和LC3（P均＜0.05）基因表达水平较MPP+处理前均明显上升，而加入SIAH-1抗体后E1（t=3.515，P=0.0170）基因水平明显上升，并降低了由MPP+引起的α-synuclein、SIAH和LC3（P均＜0.0001）基因表达水平的升高。结论(1) MPP+使SIAH表达增加，导致α-synuclein的单泛素化增强，加剧α-synuclein聚集体的形成，致α-synuclein的清除障碍。(2)加入SIAH-1抗体后可逆转上述结论(1)的病理变化，通过抑制SIAH表达，致α-synuclein的单泛素化障碍，减少α-synuclein聚集体的形成；另外升高E1表达水平，促进未聚集的α-synuclein通过泛素-蛋白酶体通路得到清除。(3) SIAH蛋白在PD的发病机制中起重要作用，是治疗帕金森病的一个重要潜在靶点。