目的探讨软骨微环境对MSCs的影响，研究多孔聚乙烯醇(PVA)及其复合物的性能与生物相容性，初步观察新型骨软骨一体化多孔材料、聚酰胺66／纳米羟基磷灰石(PA66／n-HA)、聚乙烯醇／明胶(PVA／Gel)修复兔膝关节骨软骨缺损的效果。方法①以兔关节软骨细胞和软骨细胞回收液模拟软骨微环境，并与MSCs进行单层共培养，采用镜下观察、组织学染色、Ⅱ型胶原原位杂交的方法观察其相互影响。②采用乳化发泡-冷冻固化-去除表面活性剂法获得多孔PVA、PVA╱n-HA、PVA／Gel和聚乙烯醇／壳聚糖(PVA／Cs)，并采用图像分析、力学测试、MTT法、流式细胞仪、ELISA法、与MSCs复合培养法、肌肉植入实验检测材料性能和生物相容性。③以多孔PVA或PVA／n-HA为上层材料，多孔PA66／n-HA为下层材料，制得一体化多孔材料PVA／PA66／n-HA和PVA／n-HA／PA66／n-HA，采用撕裂试验观察上下层间的结合强度，并植入兔膝关节骨软骨缺损处观察其修复效果。④以PA66／n-HA复合MSCs略低于周围软骨平面植入骨软骨缺损处，观察其修复效果。⑤以Tween 20为致孔剂制得多孔PVA／Gel，并植入兔膝关节缺损处，2周后，行第2次手术注射MSCs到材料上，观察其修复效果。结果①MSCs与软骨细胞共培养可以发生相互影响，当MSCs与软骨细胞比例为2：1时，对维持软骨细胞外基质的分泌和促进软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达是较有利的；软骨细胞的培养回收液可以引起MSCs形态上的轻度类软骨样改变和诱导MSCsⅡ型胶原mRNA的强表达，但细胞有肥大现象；MSCs回收液则对软骨细胞Ⅱ型胶原表型的维持有一定作用。②制得的多孔PVA及其复合物，亲水性好，有100～3001ma的大孔和10μm以下的微孔两级孔结构，孔与孔之间相互相互贯通，孔隙率在80％左右，有一定韧性和弹性。MTT法、肌肉植入、ELISA法、流式细胞仪检测表明，材料清洗3天，会有一定的表面活性剂(OP)残留，对材料生物相容性有一定负面影响；PVA复合物中以PVA／Gel、PVA／n-HA、PVA的生物相容性较好，其中，PVA／Gel与MSCs黏附较好，PVA／Cs也能与MSCs黏附，但肌肉植入该材料早期炎性反应较重，且在体外对软骨细胞增殖不利。③一体化多孔PVA／PA66／n-HA上下层之间的结合强度约4．00±2．21N。植入膝关节4月后，PVA／n-HA／PA66／n-HA的软骨修复效果优于PVA／PA66／n-HA，两组的下层材料均有胶原和骨组织长入。④以PA66／n-HA复合MSCs植入骨软骨缺损处，并略低于周围软骨平面，4个月后软骨修复效果较为理想，修复的软骨主要表达Ⅱ型胶原，少量表达Ⅰ型胶原。⑤制得的多孔PVA／Gel也有100μm以上的大孔和10μm以下的微孔两级孔结构，孔隙率约76％，孔与孔间相互贯通；采用2次手术的方法注射MSCs到关节缺损处的材料上，可以有效的促进软骨修复，修复的软骨已十分接近透明软骨(术后4月)，但材料稳定性还不够。结论软骨细胞与软骨细胞回收液所模拟的软骨微环境对MSCs向软骨方向分化有一定的诱导作用，这为采用MSCs作为种子细胞修复软骨损伤提供了证据，也为诱导MSCs向软骨细胞方向分化提供了一个新思路；PA66／n-HA在骨软骨损伤的修复中起了关键作用，能够维持即刻稳定和远期稳定；PVA／Gel是一种较好的软骨修复材料，未来需进一步寻找增加PVA黏附性的新方法，如进行表面修饰、添加其他材料等或制成可降解PVA；并与PA66／nHA结合，研制新的一体化多孔材料。