营养不良对大鼠脓毒症早期血浆ACTH及皮质酮的影响

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目的:观察营养不良导致的免疫力低下大鼠在脓毒症早期血浆ACTH及皮质酮的变化。方法:将126只雄性SD大鼠随机分为营养良好组(well-nourished group,WN,n=62)和营养不良组(malnutrition group,MN,n=64)。营养良好组大鼠不限制进食量,营养不良组大鼠喂食9g/d(相当于1/3日均进食量),所有大鼠均单笼饲养4周。喂养结束后,每组各取6只处死后留取大鼠脾脏及胸腺,称重记录,并观察组织形态学变化。WN组及MN组各取30只(假手术10只/组,CLP术20只/组),做生存率分析。将营养良好组及营养不良组剩余大鼠再随机分为营养良好CLP组(well-nourished CLP group,WNC,n=16)、营养良好sham组(well-nourished sham group,WNS,n=10)、营养不良CLP组(malnutrition CLP group,n=18)和营养不良sham组(malnutrition sham group,n=10),WNS组及MNS组进行假手术,WNC组及MNC组进行盲肠结扎穿孔(CLP)术。造模后8h及16h经腹主动脉采血离心后留取血清及血浆,通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)水平,留取肾上腺观察组织形态学结构、巨噬细胞分布及细胞凋亡,留取脾脏用流式细胞法检测CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞比例及M1型巨噬细胞(CD11c~+CD80~+、CD11c~+CD86~+)比例。结果:在4周喂养结束后,营养不良大鼠比营养良好大鼠体重、脾脏及胸腺均明显减轻(P<0.001)。营养不良大鼠比营养良好大鼠在CLP造模后死亡率更高(100%VS 65%,P<0.01)。在CLP术前,营养不良组比营养良好组大鼠脾脏CD4~+T淋巴细胞、CD4~+/CD8~+比值更高(P<0.05),M1巨噬细胞(CD11c~+CD80~+)亦更高(P<0.01)。而在CLP术后,营养不良及营养良好大鼠脾脏CD4~+、CD8~+T淋巴细胞及CD4~+/CD8~+比值相比于各自的基础状态均无改变;营养良好组大鼠在CLP术后M1型巨噬细胞(CD11c~+CD80~+,CD11c~+CD86~+)相比于其基础状态明显增高(P<0.01),而营养不良大鼠在CLP术后M1型巨噬细胞相比于其基础状态并无改变。与营养良好sham组相比,营养良好CLP组的血浆ACTH在术后8h、16h均无改变,但皮质酮在8h时释放明显增加(P<0.05),在16h时释放明显减少(P<0.01)。与营养不良sham组相比,营养不良CLP组血浆ACTH在8h无差异,在16h时释放增加(P<0.05),而皮质酮在术后8h及16h均无差异。营养不良及营养良好组大鼠在CLP术后血清IL-1β、IL-10均增高(P<0.01)。但营养良好CLP组与营养不良CLP组相比血清IL-1β、IL-10却并无差异。在造模后16h,营养不良组比营养良好组大鼠肾上腺皮质可见更显著的出血、炎症细胞浸润及坏死。结论:CLP诱导的脓毒症导致了血浆ACTH及皮质酮的动态变化,并导致了HPA轴调节失常。营养不良可导致大鼠脓毒症早期肾上腺皮质功能不全,抑制皮质酮的升高。
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