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一、胰腺癌组织miRNAs表达谱的研究目的:探究胰腺癌组织中miRNAs特异表达谱,发现在胰腺癌中显著性差异表达的miRNAs。方法:采用Affymetrix microRNA芯片建立胰腺癌组织miRNAs表达谱,对比癌旁组织miRNAs表达情况,从中挑选出胰腺癌组织中特异表达的miRNAs。利用KOBAS系统,预测所有特异表达的miRNA调控的靶基因,并对靶基因进行疾病,基因本体和信号通路层面的富集分析。结果:对5例胰腺癌组织,和5例胰腺癌旁组织进行miRNAs芯片分析,筛选出在胰腺癌组织中8个表达显著上调(超过10倍)的miRNAs,1个显著表达显著下调的miRNA。进行Disease, GO和Pathway层面的富集分析显示,这些表达差异的miRNA的靶基因显著参与了胰腺癌发生发展的信号通路中,如Pathways in cancer、MAPK signaling pathway、cellular binding、 Wnt signaling pathway及Pancreatic cancer等诸多信号通路,验证了我们筛选出的miRNAs确实与胰腺癌的发病相关。结论:利用胰腺癌组织与癌旁组织行miRNAs芯片分析,可以筛选出胰腺癌中特异表达的miRNAs,且通过生物信息学软件验证。二、miR-31在胰腺癌组织中的表达检测及其与临床特征相关性目的:选取在胰腺癌组织芯片分析中差异最显著的miRNAs (miR-31),通过qRT-PCR技术验证其在胰腺癌组织中的表达情况,并探究其与胰腺癌患者临床特征之间的联系。方法:收集解放军总医院2016年10月至2017年3月间12例胰腺癌组织和9例癌旁组织标本,运用荧光实时定量PCR (qRT-PCR)的方法,分别检测胰腺癌组织、癌旁组织miR-31的表达情况。根据所有患者的基础资料(性别、年龄、吸烟史)、术前化验情况(术前癌胚抗原水平、术前Ca19-9水平)、肿瘤位置、大小、最终病理情况(胰腺癌分化程度)、有无远处转移及淋巴结转移进行分组,比较胰腺癌组织中miR-31表达差异与其临床特征的相关性,分析miR-31在胰腺癌的发生发展过程中的意义。结果:1、与癌旁组织相比,miR-31在胰腺癌组织中的表达显著上调;2、胰腺癌组织中miR-31的表达与胰腺癌淋巴结转移(p<0.05)、肿瘤的分化程度(p<0.01)相关,而与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置、吸烟与否、肿瘤标志物水平无明显相关。结论:1、miR-31在胰腺癌组织表达高于癌旁组织,可以推测miR-31在胰腺癌的发生过程中可能起到促癌的作用;2. miR-31的上调与胰腺癌的的分化程度和淋巴结转移密切相关,提示miR-31可能参与了胰腺癌的发生和侵袭过程。