Semaphorin4a在脑血管病病人血清中的表达及其作用机制的研究

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目的通过检测不同类型脑血管疾病患者血清中信号素4A(Semaphorin4a, Sema4a)的表达,探讨将其作为标记物指导诊断病情的可能性;并将人外源性Sema4 a重组蛋白刺激外周血单核细胞和U937细胞后,通过检测其对细胞因子表达和分泌的影响来探讨Sema4 a在脑血管过程中的作用机制。方法收集不同类型脑血管疾病患者和健康查体者的血清,采用ELISA方法检测Sema4 a不同组别间血清中的表达水平,并通过各组受测者的临床资料分析其表达的意义;将获得的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)以及U937细胞在体外培养皿中进行培养,并用不同浓度的人外源性Sema4 a重组蛋白刺激以上两种细胞,采用荧光定量PCR、Western-blot和酶联免疫吸附实验法(ELISA)法检测这两种细胞在接受刺激后,细胞内MMP-9和Cox-2的表达量变化。结果与健康对照组相比,Sema4a在短暂性脑缺血发作组和脑梗死组血清中表达水平显着升高;在脑梗死组中的表达量也要明显高于短暂性脑缺血发作组。在脑梗死组中,Sema4 a在血清中的表达量随着颈动脉斑块的稳定性减弱而增加,也就是说其在血清中的表达随着病情的加重和斑块稳定性的减弱随之降低。在脑梗死组,Sema4a的血清表达水平在合同高血压或有吸烟史的患者中显着增高。将Sema4a重组蛋白刺激外周血单核细胞和U937后,发现细胞内的MMP-9和Cox-2的表达明显升高;而MMP-9与PGE2的分泌量也明显上调。结论通过本研究发现,可将Sema4a作为预测粥样硬化斑块稳定性以及脑梗死发病潜在可能性的血清标志物,同时可以将其作为治疗的靶点,用于下一步研究。
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