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人参(Panax ginseng)为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根及根茎,收载于历版《中国药典》,最早的药物学专著《神农本草经》将人参列为上品,四环三萜达玛烷型人参皂苷为其主要活性成分,具有显著的抗肿瘤,抗炎症,抗肥胖等多种功效。为了综合开发人参的药用价值,本实验旨对一种人参加工食品“鲜人参膏”(Fresh Ginseng Paste,FGP)的制作工艺进行了探讨并对FGP成分中多种人参皂苷进行含量测定,制定了FGP的质量标准草案。文章通过构建对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠肝损伤模型,和顺铂(CDDP)致急性肾损伤动物模型,从细胞凋亡及氧化应激等方面进一步研究了FGP对肝、肾的保护活性,同时阐释了可能的分子机制,对深入开发人参加工产品的药用价值具有深远意义。1.FGP成分分析及质量标准制定。取FGP样品通过HPLC进行分析,并进行方法学验证。显示出FGP中人参总皂苷的含量约为23mg/g,FGP中含有14种人参皂苷,分别为1.Rg1、2.Re、3.Rb1、4.Rc、5.Rb2、6.Rd、7.Rg6、8.F4、9.Rk3、10.Rh4、11.(S)-Rg3、12.(R)-Rg3、13.Rk1、14.Rg5,其中含量较高的为(S,R)Rg3、Rg5和Rk1等次级皂苷组分,经方法学考察14种人参皂苷的标准曲线及其重复率,精密度和稳定性RSD值在0.39-0.54%,14种人参皂苷对照品加样回收率集中在98.7-99.3%之间,RSD值<1.85%,已充分证明此方法可以用于FGP中人参皂苷含量测定,且稳定性较为良好。并通对FGP的原料、辅料,使用水及环境进行标准定制规范其生产质量;2.FGP对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠肝损伤的缓解作用。将32只小鼠随机分为:空白组、模型组、低剂量及高剂量给药组。实验取用血清和小鼠肝组织,分别用在检测各项生理指标及组织病理学染色。研究表明:FGP可调节小鼠的器官指数并改善血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的水平。还可改善肝组织中谷胱甘肽转移酶(GSH)的耗竭和丙二醛(MDA)水平的异常变化;3.FGP对顺铂(CDDP)致小鼠急性肾损伤的缓解作用,研究取用小鼠血清测定其生理指标同时通过H&E、TUNEL、Hoechst 33258和免疫组织化学染色法观察肾脏组织病理学变化,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞凋亡情况。结果表明:小鼠血清中肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)和丙二醛(MDA)水平有明显降低,肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)显著升高;组织糖原沉积减少,肾小管上皮细胞凋亡明显减少,同时改善了肾组织坏死和凋亡程度。Western blot分析结果表明,FGP能明显抑制Bax和cleaved caspase-3等的过表达和降低Bcl-2的水平。综上所述,本研究结果清晰地表明,FGP中富含多种人参皂苷,且次级皂苷含量较高。FGP能够通过缓解氧化应激损伤和抗凋亡作用来减少APAP引起的小鼠急性肝损伤。同时对CDDP诱导小鼠体内的氧化应激和细胞凋亡具有很好的保护活性,其可能的分子机制是通过抑制了体内Bax/Bcl-2以及caspase-3等一系列信号通路的激活,继而进一步缓解了CDDP诱导的急性肾损伤。