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目的:本实验拟从两个方面来研究生精散对弱精子症的疗效及其治疗机理,旨在获得科学规范的临床资料,并阐明生精散的作用机制,为生精散治疗弱精子症不育提供科学的理论依据,以期弘扬祖国医学之精髓。本实验对于深入研究精子特异性钙通道蛋白CatSper在弱精子症发生中的作用,进而阐明弱精子症的发病机制,寻找新的临床治疗靶点也具有重要的价值。方法:本实验采用喂服GTW的方法诱导大鼠弱精子症的发生,采用睾丸组织病理学检测(H.E染色)、精液常规分析和精子活力检测的方法,检测大鼠精子的形态与活力,建立弱精子症大鼠模型,同时采用Real-time PCR (mRNA水平检测)与免疫组化的方法,观察四种CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子质膜上的表达的变化,试图阐明以下问题:1.四种CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子质膜上的表达是否较对照组减少;2.生精散是否可以通过提高模型大鼠精子质膜CatSper的表达、增强该通道的功能来提高精子的活力。结果:1.大鼠弱精子症模型的建立采用喂服GTW的方法诱导大鼠弱精子症的发生,采用睾丸组织病理学检测(H.E染色)、精液常规分析和精子活力检测的方法,检测大鼠精子的形态与活力。结果表明:GTW组大鼠精子的活率、活力、密度以及直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)和曲线运动速度(VCL)等功能指标均较正常对照组和NS组显著降低。睾丸组织H.E染色显示,模型组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,表明GTW可以诱导稳定的弱精子症大鼠模型。2.弱精子症大鼠是否有精子特异性钙通道蛋白CatSper的表达减少通过免疫组织化学、Real-time PCR方法分别观察(CatSper1-4)在模型大鼠精子质膜上的表达是否较对照组减少。结果表明:模型组大鼠catsper蛋白表达明显较对照组减少。为进一步研究弱精子症的发生提供了基础。3.生精散具有提高精子的密度、活力、活率及运动速度的作用。通过采用计算机辅助精子分析系统(computer assisted sperm analysis, CASA)检测精子的密度、活力、活率、及运动速度等各项功能指标。结果:生精散可以明显提高模型组精子的密度、活力、活率及运动速度,从而治疗大鼠弱精子症。结论:1.GTW组大鼠精子的活率、活力、密度以及直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)和曲线运动速度(VCL)等功能指标均较正常对照组和NS组显著降低。睾丸组织H.E染色显示,模型组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,表明GTW可以诱导稳定的弱精子症大鼠模型2.弱精子模型组型组大鼠catsper蛋白表达明显较对照组减少。3.生精散可以明显提高模型组精子的密度、活力、活率及运动速度,从而治疗大鼠弱精子症。